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[求助]
淀粉消化實(shí)驗(yàn) 已有1人參與
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想請教一下大家，用豬胰酶做淀粉的消化實(shí)驗(yàn)之前，豬胰酶需要先脫鹽處理嗎？不脫鹽處理的話對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響嗎？謝謝 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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不用，但是有一個(gè)前處理的步驟（一般文獻(xiàn)里不會(huì)寫），如下： 1）Dilute 3.15 mL amyloglucosidase with 3.6 mL deionized water. (Diluted amyloglucosidase, 140 unit/mL); 2）Weigh 3.0 g pancreatin into each of four centrifuge tubes and suspend each portion in 20 mL deionized water; 3）Stir for 10 min; 4）Centrifuge for 10 min at 1,500 × g (~4000 rpm) 5）Take 13.5 mL supernatant from each tube (54 mL total) and mix with 6 mL diluted amyloglucosidase and 4 mL invertase (3000 EU/mL，這個(gè)酶不加也可以). 一般淀粉消化，需要這兩種酶， amyloglucosidase（淀粉轉(zhuǎn)葡萄糖苷酶）和pancreatin（也就是Sigma賣的豬胰酶）。 其次，你想想，豬胰酶是怎么生產(chǎn)出來的？ 取出豬的胰腺，然后一系列地處理，得到最終的豬胰酶； 豬胰酶，其實(shí)就是一大塊胰腺啊，是一個(gè)混合酶體系，而且有一部分是不溶于水的； 所以前處理，需要用水把里面具有活性的酶給提取出來再使用； 目的也是為了模擬人體的胰腺吧，才把豬的胰腺整塊取出加工； 也沒辦法，目前是國際通用方法。 |
2樓2020-05-14 03:26:54
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好的，謝謝。所以如果不進(jìn)行這一步前處理的話，會(huì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響嗎？是不是酶的活性會(huì)受到抑制呢 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2020-05-14 10:06:44
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4樓2020-05-15 01:04:43
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