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癲狂版鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
C18色譜柱可能被蛋白質(zhì)污染了，常規(guī)沖柱方法都沒(méi)有用該咋辦 已有2人參與
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前段時(shí)間在做代謝實(shí)驗(yàn)，由于普通的甲醇乙腈變性蛋白質(zhì)使我的目標(biāo)化合物無(wú)法檢測(cè)到，于是參考文獻(xiàn)嘗試少量甲酸變性，結(jié)果最近柱壓升的厲害，雖然本來(lái)也很高了。色譜柱為ACE excel3 C18-AR，目前初始95：5水乙腈，0.6流速柱壓240bar+。這個(gè)條件是更換了預(yù)柱柱心，液相脫氣閥的一個(gè)柱芯后的柱壓。 嘗試了幾種沖洗方法： 1、高水相低流速正沖； 2、純甲醇低流速正沖； 3、咨詢技術(shù)支持后90：10乙腈水，低流速逐漸升高反沖； 4、（技術(shù)支持）85：15異丙醇水低流速反沖。 目前看效果都不明顯。 試了這么多辦法，很多不得不用的辦法都用上了還是沒(méi)效果，目前還是覺(jué)得最有可能的污染物是蛋白質(zhì)，不過(guò)不能確定污染物是否只在篩板還是已經(jīng)進(jìn)到柱頭里了，非常絕望，求助一下各位大神，還有什么除了換柱子的其他路子再拯救一下，謝謝大家了  |
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3樓2020-04-03 13:32:13
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4樓2020-04-07 14:58:44
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