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信天謹(jǐn)游新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
BCA蛋白測(cè)定，空白吸光度大于樣品吸光度的問(wèn)題。 已有3人參與
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再下小蟲(chóng)一枚，望各位有過(guò)經(jīng)驗(yàn)的不吝賜教。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菧y(cè)定樣品中蛋白濃度計(jì)算回收率。會(huì)按照同方法做不加樣品的管作為空白對(duì)照。在BCA 測(cè)蛋白濃度時(shí)得到的結(jié)果確實(shí)空白的吸光度大于樣品的吸光度。這樣算下來(lái)樣品中含有的蛋白量就是負(fù)數(shù)了。這是不符合實(shí)驗(yàn)的。 （已經(jīng)掃描過(guò)空白樣品中所含的物質(zhì)在紫外區(qū)沒(méi)有吸光度） 若把樣品和空白稀釋10倍，發(fā)現(xiàn)稀釋后的吸光度與稀釋之前的竟差不多，有幾個(gè)孔甚至還略高與稀釋前的。老師說(shuō)生物樣品就是會(huì)出現(xiàn)越稀釋越高的現(xiàn)象。 我不太懂。 我現(xiàn)在想知道我該怎么修改實(shí)驗(yàn)過(guò)程或是換其他方法，能準(zhǔn)確測(cè)定蛋白濃度呢？望各位老師同學(xué)給點(diǎn)高見(jiàn)？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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weebug
版主 (著名寫(xiě)手)
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6樓2020-04-10 10:11:51
fu251628849
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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之前測(cè)蛋白濃度，就是因?yàn)榭瞻讓?duì)照加樣時(shí)不小心出現(xiàn)了氣泡，就出現(xiàn)你說(shuō)的情況，不知道你的是啥情況?我也做過(guò)類(lèi)似你說(shuō)的實(shí)驗(yàn)，就是空白沒(méi)有任何東西，只是和處理組的操作過(guò)程一樣，加了同樣的處理試劑，做過(guò)不少，但沒(méi)出現(xiàn)你說(shuō)的情況。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
2樓2020-04-01 21:54:03
信天謹(jǐn)游
新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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3樓2020-04-01 22:55:48
ECUST_CAPF
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4樓2020-04-09 14:55:23
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