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信天謹(jǐn)游新蟲 (正式寫手)
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BCA蛋白測定,空白吸光度大于樣品吸光度的問題。 已有3人參與
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再下小蟲一枚,望各位有過經(jīng)驗(yàn)的不吝賜教。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菧y定樣品中蛋白濃度計(jì)算回收率。會(huì)按照同方法做不加樣品的管作為空白對(duì)照。在BCA 測蛋白濃度時(shí)得到的結(jié)果確實(shí)空白的吸光度大于樣品的吸光度。這樣算下來樣品中含有的蛋白量就是負(fù)數(shù)了。這是不符合實(shí)驗(yàn)的。 (已經(jīng)掃描過空白樣品中所含的物質(zhì)在紫外區(qū)沒有吸光度) 若把樣品和空白稀釋10倍,發(fā)現(xiàn)稀釋后的吸光度與稀釋之前的竟差不多,有幾個(gè)孔甚至還略高與稀釋前的。老師說生物樣品就是會(huì)出現(xiàn)越稀釋越高的現(xiàn)象。 我不太懂。 我現(xiàn)在想知道我該怎么修改實(shí)驗(yàn)過程或是換其他方法,能準(zhǔn)確測定蛋白濃度呢?望各位老師同學(xué)給點(diǎn)高見? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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之前測蛋白濃度,就是因?yàn)榭瞻讓?duì)照加樣時(shí)不小心出現(xiàn)了氣泡,就出現(xiàn)你說的情況,不知道你的是啥情況?我也做過類似你說的實(shí)驗(yàn),就是空白沒有任何東西,只是和處理組的操作過程一樣,加了同樣的處理試劑,做過不少,但沒出現(xiàn)你說的情況。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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