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wangdmqibebt鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)問(wèn)，想確定一個(gè)蛋白的亞細(xì)胞定位，除了做GFP融合蛋白之類，還有什么方法？ 已有1人參與
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不是模式物種，沒(méi)有遺傳工具，所以融合蛋白之類的工作無(wú)法完成。其他還有什么辦法能確定蛋白的位置？ 謝謝大牛們！ |
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鐵蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 植物生理與生化
【答案】應(yīng)助回帖
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你這個(gè)問(wèn)題，建議直接用生信預(yù)測(cè)亞細(xì)胞定位，如果結(jié)果和你想要的結(jié)果一樣就沒(méi)必要一定要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)做它。如果結(jié)果不一致，這個(gè)問(wèn)題就復(fù)雜了，要自己去分析你這個(gè)蛋白，是分泌蛋白，能否跨膜什么的，因?yàn)檫@個(gè)蛋白位置是會(huì)變的，有可能這個(gè)蛋白在膜上，但發(fā)揮功能的時(shí)候需要結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)體或者靶蛋白，轉(zhuǎn)運(yùn)到其它位置發(fā)揮作用，所以導(dǎo)致定位不準(zhǔn)。 簡(jiǎn)而言之，不想做GFP，要么送公司做，要么就去分析這個(gè)蛋白，只要你分析說(shuō)的通就沒(méi)問(wèn)題，當(dāng)然這必須建立在你對(duì)這個(gè)蛋白的理解非常到位的基礎(chǔ)上。僅供參考，我對(duì)這個(gè)定位也有疑惑，因?yàn)槲蚁胫苯涌茨硞�(gè)蛋白在某個(gè)時(shí)間點(diǎn)，在細(xì)胞里面的表達(dá)情況，然后確定我這個(gè)蛋白是在什么時(shí)候從膜上轉(zhuǎn)移的。如有了解，歡迎討論。 |
2樓2020-07-02 11:11:03
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