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wangdmqibebt鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)問,想確定一個(gè)蛋白的亞細(xì)胞定位,除了做GFP融合蛋白之類,還有什么方法? 已有1人參與
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不是模式物種,沒有遺傳工具,所以融合蛋白之類的工作無法完成。其他還有什么辦法能確定蛋白的位置? 謝謝大牛們! |
鐵蟲 (初入文壇)
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你這個(gè)問題,建議直接用生信預(yù)測(cè)亞細(xì)胞定位,如果結(jié)果和你想要的結(jié)果一樣就沒必要一定要通過實(shí)驗(yàn)來做它。如果結(jié)果不一致,這個(gè)問題就復(fù)雜了,要自己去分析你這個(gè)蛋白,是分泌蛋白,能否跨膜什么的,因?yàn)檫@個(gè)蛋白位置是會(huì)變的,有可能這個(gè)蛋白在膜上,但發(fā)揮功能的時(shí)候需要結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)體或者靶蛋白,轉(zhuǎn)運(yùn)到其它位置發(fā)揮作用,所以導(dǎo)致定位不準(zhǔn)。 簡而言之,不想做GFP,要么送公司做,要么就去分析這個(gè)蛋白,只要你分析說的通就沒問題,當(dāng)然這必須建立在你對(duì)這個(gè)蛋白的理解非常到位的基礎(chǔ)上。僅供參考,我對(duì)這個(gè)定位也有疑惑,因?yàn)槲蚁胫苯涌茨硞(gè)蛋白在某個(gè)時(shí)間點(diǎn),在細(xì)胞里面的表達(dá)情況,然后確定我這個(gè)蛋白是在什么時(shí)候從膜上轉(zhuǎn)移的。如有了解,歡迎討論。 |

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