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大鵬同學(xué)鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)問各位老師前輩 我pmp柱前衍生化單糖組成分析,標(biāo)準(zhǔn)糖和混... 已有1人參與
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請(qǐng)問各位老師前輩 我pmp柱前衍生化單糖組成分析,標(biāo)準(zhǔn)糖和混標(biāo)溶液濃度為10mM,取100μL加等體積的0.3M氫氧化鈉和0.5M PMP,70℃反應(yīng)90min,然后冷卻加100μL0.3M鹽酸中和,加水到1 mL 再用氯仿萃取,取水層過膜跑液相,流動(dòng)相為磷酸鹽和乙腈85:15等度洗脫,但是液相結(jié)果很不理想。除了衍生劑就只出來一個(gè)峰。是反應(yīng)操作過程有問題嗎?反應(yīng)時(shí)間太長?反應(yīng)過程是否需要避光?還是色譜柱有要求?用的是ZORBAX SB-C18 4.6*150 是否存在有些單糖不好反應(yīng)?需要注意哪些細(xì)節(jié),請(qǐng)各位前輩不吝賜教,感激不盡! @cgjlove 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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剛巧我最近也在做單糖組成,之前是用pH6.0的0.02M磷酸鹽(83:17)跑的,樣品都跑出來了,混標(biāo)不太清楚。這次換了調(diào)pH6.74再試著跑下標(biāo)準(zhǔn)品。不知道你跑了幾種單標(biāo)只出一個(gè)峰 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
鐵蟲 (小有名氣)
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