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webbzc新蟲(chóng) (初入文壇)
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求助�。PCR絕對(duì)定量，可以用提取的細(xì)菌基因組DNA作為標(biāo)準(zhǔn)品么？ 已有1人參與
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| 本人生物小白一枚，最近想用實(shí)時(shí)熒光定量qPCR對(duì)幾種細(xì)菌DNA進(jìn)行絕對(duì)定量。查到的好多方法都是說(shuō)，得用目的基因轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒去做標(biāo)準(zhǔn)品，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。但是本人想直接用提取的細(xì)菌基因組DNA（或者用普通PCR產(chǎn)物也就是目的基因）進(jìn)行定量、倍比稀釋作為標(biāo)準(zhǔn)品。但是沒(méi)有查到相關(guān)資料，不知道各位大佬的實(shí)驗(yàn)室有沒(méi)有這樣做過(guò)，望指教！ |
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E1nstein
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-12-29 22:11:59
西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-12-29 22:11:59
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可以直接用pcr產(chǎn)物，跑電泳切膠回收目的條帶，然后用作標(biāo)準(zhǔn)品，可以一起交流呀 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
5樓2019-12-27 17:35:54
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-12-29 22:11:44
西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-12-29 22:11:44
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用質(zhì)粒做標(biāo)準(zhǔn)品，因?yàn)橘|(zhì)粒濃度是可以精準(zhǔn)定量的，這樣你的絕對(duì)定量才有意義。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
2樓2019-12-04 23:38:27
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謝謝，但是最近看到文獻(xiàn)中，有直接從標(biāo)準(zhǔn)菌株中提取基因組Dna,定量后倍比稀釋作為標(biāo)準(zhǔn)品的。不知道該方法有什么弊端么？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2019-12-08 21:27:32
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謝謝您，但是最近看到文獻(xiàn)中，有直接從標(biāo)準(zhǔn)菌株中提取基因組Dna,定量后倍比稀釋作為標(biāo)準(zhǔn)品的。不知道該方法有什么弊端么？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
4樓2019-12-08 21:27:57
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