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shikicat新蟲 (初入文壇)
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想問下淀粉模擬體外消化的問題 已有3人參與
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就是通過這個實驗來測血糖生成指數(shù),GOPOD法和DNS法都嘗試過,最后的結(jié)果始終不對; 我采用的是GOPOD法來測淀粉水解率,測試樣品是紅薯粉絲,雖然吸光度值隨著時間推移在上升,但是計算結(jié)果仍然很低,關(guān)于這點,我真的百思不得其解。 粉絲樣品,測出來的淀粉是74.5g/100g,因為實驗只用了0.1ml樣品液,按照濃度100mg/50ml來計算,每0.1ml樣品液含淀粉149微克,但是按照GOPOD法算出來的葡萄糖含量只有1~19微克左右,換算成水解率最多只有13%,用碘檢測上清液,又不呈藍色,還請各位大佬看看,究竟問題出在哪里?? ![]() ![]() ![]() 萬分感謝。 方法如下: A. 試劑配制: 混合酶液:稱量1.16g的豬胰α-淀粉酶和0.03g的糖化酶于燒杯中加水溶解,轉(zhuǎn)移至200ml容量瓶中用蒸餾水定容; 乙酸-乙酸鈉緩沖液:稱取1.64g乙酸鈉溶于水中,加入100ml容量瓶用蒸餾水定容,并調(diào)pH至5.2。 無水乙醇,葡萄糖氧化酶試劑盒; B. 步驟: 1、稱取100mg樣品置于50mL離心管中(再做兩個平行) 2、加入2mL水,沸水浴 10min糊化 3、添加13mL pH5.2的0.2mol/L的乙酸-乙酸鈉緩沖液,在37°C恒溫水浴下平衡10min; 4、再加0.2mL混合酶液(豬胰α-淀粉酶 290U/mL,糖化酶15U/mL),在37°C恒溫水浴下振蕩(轉(zhuǎn)速為150r/min)并準(zhǔn)確計時。 5、振蕩反應(yīng)0min,30min,60min,90min,120min,180min后分別取 0.1mL 上清液加入至2mL無水乙醇進行滅酶處理, 6、用GOPOD葡萄糖試劑盒在510nm處比色測定葡萄糖含量,每個樣品平行測定3次取平均值,繪制淀粉水解曲線。 7、將3ml GOPOD的試劑加入0.1ml的樣品溶液混合,并在40-50℃孵化20Min。在510nm波長下讀取數(shù)值(和試劑空白作對比) 來源:南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 《不同添加物對擠壓重組米血糖生成指數(shù)及性質(zhì)的影響》 |
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