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�。�！求助大佬~檢測基因敲入的基因組PCR（genome PCR
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引物設(shè)計在敲入位點同源臂的上、下游，之前流式檢測出的敲入成功率大概是10%，我是進行分選富集之后提基因組檢測的，如果敲入成功應(yīng)擴增出約4600bp的片段，如果沒敲入成功應(yīng)擴增出約1800bp的片段，由于敲入率低，因此兩個長度的條帶理論上都應(yīng)該P出來。但實際我只P出了1800bp的片段，4600bp的片段偶爾能隱約看到但沒有說服力，這可能是PCR產(chǎn)物長度差異過大加上敲入率低導(dǎo)致的。所以想求教各位大佬，這種情況該怎么優(yōu)化PCR條件才能把長片段P出來？？？先謝過大家了！�。� 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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woshishui916
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2樓2019-10-21 21:16:51
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