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321wangke321金蟲 (正式寫手)
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[交流]
轉(zhuǎn)基因之前的問題
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請問各位,我準(zhǔn)備轉(zhuǎn)一個(gè)基因到番茄中,在選擇載體和啟動(dòng)子方面有些疑惑,請大家?guī)兔纯础?br />
1、載體選擇。目前過表達(dá)載體目前很多,我手頭只有35S::pcambio1300-YFP載體,這個(gè)載體有人轉(zhuǎn)過番茄,但是轉(zhuǎn)化效率不詳; 2、啟動(dòng)子。由于該載體是35S啟動(dòng)子,有研究發(fā)現(xiàn)強(qiáng)外源基因的過表達(dá)會(huì)抑制植株的生長,那有沒有更合適的啟動(dòng)子。很多人用基因自身的啟動(dòng)子或者化學(xué)誘導(dǎo)的啟動(dòng)子,不知道哪一種好一些; 3、標(biāo)簽。很多研究為了下游試驗(yàn)方便,如定位、CHIP、CoIP等,加入熒光蛋白或者myc等標(biāo)簽,這些標(biāo)簽的加入是否影響基因的表達(dá)或者基因的功能; 4、有沒有其他注意事項(xiàng)。 |

新蟲 (正式寫手)
新蟲 (正式寫手)
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1,沒有別的載體,又懷疑有的轉(zhuǎn)化不祥。轉(zhuǎn)化效率不應(yīng)該是有多個(gè)載體,對比的時(shí)候考慮的嗎。 只有一個(gè),這個(gè)不轉(zhuǎn),是可以不用做了嗎 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (正式寫手)
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2,有其他啟動(dòng)子的載體,一起做,確定會(huì)不會(huì)抑制。沒做實(shí)驗(yàn),只有思考,有誰能確定有沒有問題呢。實(shí)驗(yàn)方案,都做,會(huì)解除自己的疑惑, 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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