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321wangke321金蟲(chóng) (正式寫手)
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[交流]
轉(zhuǎn)基因之前的問(wèn)題
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請(qǐng)問(wèn)各位，我準(zhǔn)備轉(zhuǎn)一個(gè)基因到番茄中，在選擇載體和啟動(dòng)子方面有些疑惑，請(qǐng)大家?guī)兔纯础?br />
1、載體選擇。目前過(guò)表達(dá)載體目前很多，我手頭只有35S::pcambio1300-YFP載體，這個(gè)載體有人轉(zhuǎn)過(guò)番茄，但是轉(zhuǎn)化效率不詳； 2、啟動(dòng)子。由于該載體是35S啟動(dòng)子，有研究發(fā)現(xiàn)強(qiáng)外源基因的過(guò)表達(dá)會(huì)抑制植株的生長(zhǎng)，那有沒(méi)有更合適的啟動(dòng)子。很多人用基因自身的啟動(dòng)子或者化學(xué)誘導(dǎo)的啟動(dòng)子，不知道哪一種好一些； 3、標(biāo)簽。很多研究為了下游試驗(yàn)方便，如定位、CHIP、CoIP等，加入熒光蛋白或者myc等標(biāo)簽，這些標(biāo)簽的加入是否影響基因的表達(dá)或者基因的功能； 4、有沒(méi)有其他注意事項(xiàng)。 |
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2樓2024-04-27 08:34:24
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1，沒(méi)有別的載體，又懷疑有的轉(zhuǎn)化不祥。轉(zhuǎn)化效率不應(yīng)該是有多個(gè)載體，對(duì)比的時(shí)候考慮的嗎。 只有一個(gè)，這個(gè)不轉(zhuǎn)，是可以不用做了嗎 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2024-04-27 08:35:43
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2，有其他啟動(dòng)子的載體，一起做，確定會(huì)不會(huì)抑制。沒(méi)做實(shí)驗(yàn)，只有思考，有誰(shuí)能確定有沒(méi)有問(wèn)題呢。實(shí)驗(yàn)方案，都做，會(huì)解除自己的疑惑， 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
4樓2024-04-27 08:39:48
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