 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (2987)
- 蟲(chóng)友互識(shí) (222)
- >導(dǎo)師招生 (213)
- >考研 (195)
- >招聘信息布告欄 (81)
- >文獻(xiàn)求助 (55)
- >休閑灌水 (48)
- >考博 (42)
- >博后之家 (31)
- >碩博家園 (28)
- >基金申請(qǐng) (19)
- >教師之家 (15)
- >論文投稿 (15)
- >SciFinder/Reaxys (9)
- >找工作 (9)
- >公派出國(guó) (7)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2758 | 回復(fù): 10 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
炸魚(yú)條yy新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
RCA滾環(huán)擴(kuò)增中用到的酶的問(wèn)題 已有1人參與
|
|
| 我看到都是用phi29這種酶來(lái)做滾還擴(kuò)增，用KF聚合酶可以做嗎，以及這兩種酶之間有什么區(qū)別？有做過(guò)的前輩可以分享一下嗎。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
一志愿安徽大學(xué)材料工程專碩313分，求調(diào)劑的學(xué)校
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
考研一志愿長(zhǎng)安大學(xué)材料與化工309分請(qǐng)求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
282分材料專業(yè)求調(diào)劑院校
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
085600材料與化工 326 求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085600材料與化工，一志愿廣州985，求調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
環(huán)境調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料調(diào)劑，307分
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
0817一志愿蘇州大學(xué)280復(fù)試調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
化工284求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
2026級(jí)碩士研究生招生/調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
SX花開(kāi)有聲
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 56.8
- 帖子: 26
- 在線: 8.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 7734388
- 注冊(cè): 2018-01-06
- 性別: MM
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
3樓2019-10-09 09:08:34
Tiriosh
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 84 (初中生)
- 金幣: 20347.3
- 散金: 3123
- 紅花: 66
- 帖子: 3674
- 在線: 5881.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2417244
- 注冊(cè): 2013-04-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
除了一般的DNA聚合外，RCA最大的特點(diǎn)是需要聚合酶持續(xù)的把之前生成的雙開(kāi)“頂開(kāi)”，也就是說(shuō)需要具有strand displacement性能。根據(jù)NEB官網(wǎng)信息，KF是Moderate strand displacement activity，感覺(jué)應(yīng)該可以做RCA但是可能效率會(huì)有影響。與之相對(duì)，phi29是strong strand displacement activity。 做RCA用的酶，除了strand displacement性能之外還會(huì)考慮exonuclease activity性能，是否具備這一性能對(duì)于RCA的實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)有影響。KF不具備外切酶活性（以NEB官網(wǎng)說(shuō)明為準(zhǔn)，來(lái)源不同話可能性能有所不同）那么對(duì)primer的處理就需要保證其3'端是結(jié)核在circular tempalte上，通常的做法是用外切酶trim一下，這也要看你的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)咯。 此外，phi29的一個(gè)很大的問(wèn)題是其最適溫度是30°，所以反應(yīng)速度會(huì)慢一些。如果你是處于提高反應(yīng)溫度考慮而換酶的話，推薦你使用EquiPhi29，是phi29的熱穩(wěn)定版。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
炸魚(yú)條yy2樓2019-10-08 20:48:04
Tiriosh
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 84 (初中生)
- 金幣: 20347.3
- 散金: 3123
- 紅花: 66
- 帖子: 3674
- 在線: 5881.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2417244
- 注冊(cè): 2013-04-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
4樓2019-10-09 14:53:14
炸魚(yú)條yy
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 56.5
- 帖子: 7
- 在線: 18.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 6658507
- 注冊(cè): 2017-06-01
- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
5樓2019-10-11 14:50:32
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 調(diào)劑的考研學(xué)生 2026-03-09 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 320材料與化工，求調(diào)劑 +11 | 鶴遨予卿 2026-03-04 | 13/650 |
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥319分求調(diào)劑 +4 | Tolkien 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +4 | Yyt楊1 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +3 | squirtle11 2026-03-07 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +9 | fjj0912 2026-03-03 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +6 | Bananaiy 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿華中科大0702，數(shù)一英一，293 +4 | 小羅露一二 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程317分求調(diào)劑 +9 | 6汆尼9 2026-03-07 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，不管什么專業(yè)，我是可塑造的人才一枚，希望遇到知己老師撈撈我 +4 | 13102137290 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 誠(chéng)求調(diào)劑，323分 有專利/科研/實(shí)習(xí)經(jīng)歷 +6 | 橙子cyx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 298 調(diào)劑 +11 | 小西笑嘻嘻 2026-03-03 | 11/550 |
|
|
|
[考研]
 085600材料與化工 292分 求調(diào)劑
+6
|
程晴之 2026-03-06 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 呼呼？~+123456 2026-03-06 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +7 | 呼呼？~+123456 2026-03-05 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +3 | 林小星發(fā)大財(cái) 2026-03-05 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085602 293分求調(diào)劑 +3 | SivanNano. 2026-03-05 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿西交化工專碩288專業(yè)課93求調(diào)劑 +6 | 好運(yùn)好運(yùn)接接 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩材料275調(diào)劑 +9 | 路三三 2026-03-03 | 9/450 |
|