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Mayprincess新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
植物組織免疫組化實(shí)驗(yàn)求助 已有1人參與
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請(qǐng)教各位蟲(chóng)友一些關(guān)于免疫組化的問(wèn)題。我的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中樣品自發(fā)熒光很強(qiáng)，導(dǎo)致我無(wú)法確定目標(biāo)抗原到底有沒(méi)有與抗體結(jié)合。 我的材料是花藥，想定位花粉壁上的果膠位置。用的FAA固定的石蠟切片。按照常規(guī)的IHC的方法，脫蠟—復(fù)水—微波抗原修復(fù)—過(guò)氧化氫滅活—牛血清蛋白背景封閉—一抗二抗孵育—抗熒光淬滅劑封片。每個(gè)過(guò)程都有用PBS洗了，但是在上機(jī)觀察發(fā)現(xiàn)空白對(duì)照組和處理組都有很強(qiáng)的熒光，而且熒光強(qiáng)度差不多。然后我又用脫完蠟未經(jīng)處理的片子看也有很強(qiáng)的熒光，熒光強(qiáng)度也和前兩個(gè)差不多。所以我認(rèn)為這是自發(fā)熒光，并推測(cè)處理組的目標(biāo)抗原并未與抗體結(jié)合，否則其熒光強(qiáng)度應(yīng)該比另外兩個(gè)對(duì)照組強(qiáng)。請(qǐng)教各位蟲(chóng)友，有什么方法可以消除自發(fā)熒光？ @gyesang @hc-material 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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2樓2019-06-28 00:55:16
Mayprincess
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3樓2019-06-28 08:58:50
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4樓2019-06-28 15:49:55
5樓2019-07-30 12:26:50
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