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fast-rui新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
異源表達(dá)蛋白遇到問(wèn)題 已有8人參與
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本人最近在做異源表達(dá),用的pet28a表達(dá)載體,宿主菌是BL21,od搖到0.6-0.8,16℃誘導(dǎo)19h,做了幾次蛋白大部分都在包涵體中,iptg濃度試過(guò)0.1-0.8mM的。這次打算試試培養(yǎng)基多調(diào)幾個(gè)ph試試。 但是想問(wèn)就是我的蛋白等電點(diǎn)是6.74,LB的ph會(huì)影響表達(dá)嗎?破碎的時(shí)候蛋白裂解液的ph設(shè)為多少比較合適?有沒(méi)有大神可以給我點(diǎn)建議,看看能不能把包涵體減少。 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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兩個(gè)方案,用pGEX4T-1這樣的融合表達(dá)系統(tǒng),二是用rosetta這樣的宿主菌 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
新蟲(chóng) (小有名氣)
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