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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 蛋白/酶 » 異源表達蛋白遇到問題
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fast-rui新蟲 (小有名氣)
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[交流]
異源表達蛋白遇到問題 已有8人參與
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本人最近在做異源表達，用的pet28a表達載體，宿主菌是BL21，od搖到0.6-0.8，16℃誘導19h，做了幾次蛋白大部分都在包涵體中，iptg濃度試過0.1-0.8mM的。這次打算試試培養(yǎng)基多調(diào)幾個ph試試。 但是想問就是我的蛋白等電點是6.74，LB的ph會影響表達嗎？破碎的時候蛋白裂解液的ph設為多少比較合適？有沒有大神可以給我點建議，看看能不能把包涵體減少。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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fast-rui
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- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
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您好，我還想問一下，我想試一下更低溫度的誘導（比如4℃或者10℃），那么OD值應該搖到多少合適？要1.0以上嗎？和0.6-0.8有啥區(qū)別？ 如果要這兩個溫度誘導的話，是不是誘導時間也不用過夜，2-3h就夠了？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
19樓2019-06-25 10:45:40
2樓2019-06-11 21:03:08
3樓2019-06-11 22:22:47
fast-rui
新蟲 (小有名氣)
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4樓2019-06-11 22:44:34
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