 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1566 | 回復: 9 | ||
| 【獎勵】 本帖被評價4次，作者guzijing增加金幣 3.2 個 | ||
[資源]
【整理總結(jié)】組織培養(yǎng)中的清洗與消毒
|
||
|
內(nèi)附【細胞生物學、細胞培養(yǎng)、神經(jīng)干細胞實驗方法】清洗 一、玻璃器皿的清洗： 一般玻璃器皿的清洗包括以下幾個步驟：浸泡、刷洗、浸酸、沖洗四個步驟 浸泡： 一般初次使用和培養(yǎng)用后的玻璃器皿都需要先用清水浸泡，以便軟化和清除附著物，新的玻璃器皿，玻璃面常帶有很多干涸的灰塵，同時在生產(chǎn)過程中，玻璃表面常呈堿性并帶有一些對細胞有毒的物質(zhì)，如鉛和砷等。新的瓶子使用前應先用自來水簡單沖洗，然后用稀鹽酸（5%）浸泡過夜，以中和其中的堿性物質(zhì)。培養(yǎng)后的玻璃皿往往附著有大量的蛋白質(zhì)，干涸后不易刷洗掉，故用后要立即浸入清水中；注意讓水能完全進入瓶皿中，不應留有氣泡。（Libertad： 我們實驗室一般直接加入洗滌劑直接浸泡過夜）。 刷洗： 浸泡后的玻璃皿一般仍要用毛刷沾著洗滌劑刷洗，除去較牢固的雜質(zhì)，刷洗的次數(shù)太多，會損害器皿的光澤度，所以要選用軟毛刷和優(yōu)質(zhì)的洗滌劑，不能使用含沙粒的去污粉，刷洗的時候要特別注意瓶角的位置（Libertad：洗滌劑可選用洗潔精或者洗衣粉） 浸酸： 刷洗不掉的極微量雜志經(jīng)過硫酸和重鉻酸鉀清潔液浸泡劑的強氧化作用后，可以被除掉，清潔液對于玻璃器皿無腐蝕作用，去污能力很強，是清洗過程中極為關(guān)鍵的一環(huán)。清潔液由重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水按照一定的比例配制而成。浸泡時，器皿應該充滿清潔液，勿留有空氣。浸泡時間不應低于6小時，一般應浸泡過夜。 清洗液可以根據(jù)需要，配制成不同的強度，常用的有以下三種： 【強液】 重鉻酸鉀 63 g 濃硫酸 1000 ml 蒸餾水 200 ml 【次強酸】 重鉻酸鉀 120 g 濃硫酸 200 ml 蒸餾水 1000 ml 【弱酸】 重鉻酸鉀 100 g 濃硫酸 100 ml 蒸餾水 100 ml 注：配制時應注意安全，穿戴耐酸手套和圍裙。保護好面部等身體裸露的部分。配制時應先使重鉻酸鉀溶于水中（有時可能不會完全溶解），然后緩緩加入濃硫酸，此時產(chǎn)生的熱可以有助于重鉻酸鉀的溶解。配成后的清潔液一般呈棕紅色，經(jīng)長時間使用后，因有機溶劑和水分增多逐漸會變成綠色，表明已經(jīng)失效，要重新配制。舊的清潔液仍有一定的腐蝕作用，用后應妥善處理。（Libertad：一般選用配制強酸，廢棄失效的清潔液可深埋土中）。 沖洗： 刷洗浸酸后都必須用水沖洗，使之不留任何殘跡�？捎孟礈煅b置沖洗。如用手工操作的話，每個瓶子都需灌滿水，倒掉，重復10次以上，最后用蒸餾水漂洗2~3次，烘箱烘干備用。 二、膠塞的清洗 組織培養(yǎng)中用到的膠塞初次使用時帶有大量的滑石粉，應先用自來水沖洗，再進行常規(guī)清洗。常規(guī)清洗的方法：每次用后的膠塞要置入水中浸泡，然后用2%NaOH煮沸10~20分鐘，除掉培養(yǎng)中的蛋白質(zhì)。自來水沖洗，然后用1%的稀鹽酸浸泡30分鐘，最后用自來水和蒸餾水沖洗2~3次。（Libertad：常規(guī)清洗的方法這里描述的相對繁瑣，我們一般直接加入洗潔精浸泡后，用毛刷刷洗，然后清水沖凈，最后用三蒸水沖洗3遍，未出現(xiàn)問題）。 三、塑料器皿的沖洗： 一般第一次使用的塑料器皿均已經(jīng)過消毒滅菌密封包裝好的，使用時直接打開包裝使用即可。需要重復使用的塑料器皿，一般還可使用2~3次，不宜過多，塑料器皿一般不宜使用毛刷刷洗，造成清洗困難。因此刷洗的時候的雜質(zhì)可用脫脂棉拭掉，用流水沖洗干凈，晾干，在用2%的NaOH浸泡過夜，然后用5%的鹽酸浸泡30分鐘，最用用清水和蒸餾水漂洗干凈，晾干備用。（Libertad：前述步驟比較是書上規(guī)范的操作過程，在實踐中，我們發(fā)現(xiàn)如果實驗經(jīng)費有限，要重復使用的話，可以用軟毛刷加洗潔精謹慎刷洗后，清水沖凈，三蒸水沖洗，最后用滅菌鍋消毒滅菌處理即可使用） 四、包裝 包裝的目的是防止消毒滅菌后再次遭受污染。所以培養(yǎng)用品在消毒滅菌處理前要經(jīng)過嚴格包裝。清洗后的器皿烘箱中烘干后可用包裝紙、硫酸紙、棉布、鋁飯盒和特制玻璃或金屬制的消毒桶（一般放吸管）包裝起來。有字的紙和棉紙不宜做包裝使用。 【局部包裝】較大的器皿、濾器，消毒筒等只要把瓶口部分用硫酸紙包裹后，再罩以牛皮紙或棉布密封起來用線扎緊。 【全包裝】較小的器皿、注射器、金屬器械和膠塞等，多使用全包裝，現(xiàn)在多采用裝入鋁飯盒的方法。吸管在裝入消毒筒前，應該先使用少許的脫脂棉將吸管接口端堵塞，松緊度適宜；過度易脫落，過緊不透氣，影響使用。然后裝入消毒筒中；消毒筒的底部應該墊上軟紙或者棉花以防止吸管裝入的時候折斷管尖；最后再包裝入筒中封口。（LIbertd：對于瓶子，可使用錫箔紙包裹瓶口后，用牛皮紙扎緊，放入自制的布袋子包裹。離心管等較小的器皿可放入鋁飯盒中，再用布袋子包裹。200ul、3000ml 1ml的槍頭可在槍頭盒中裝好后，用白紙包裹，再用布袋子包裹。） 消毒： 消毒的方法因物品不同而異。消毒方法分為三類：物理消毒法，包括紫外線、干熱、濕熱（高壓蒸汽）、離心、過濾以及射線等手段；化學滅菌主要指化學消毒劑等。 |
回復此樓» 本帖附件資源列表
-
歡迎監(jiān)督和反饋：小木蟲僅提供交流平臺，不對該內(nèi)容負責。
本內(nèi)容由用戶自主發(fā)布，如果其內(nèi)容涉及到知識產(chǎn)權(quán)問題，其責任在于用戶本人，如對版權(quán)有異議，請聯(lián)系郵箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 細胞生物學、細胞培養(yǎng)、神經(jīng)干細胞實驗方法.docx
2019-05-27 17:59:18, 69.72 K
» 猜你喜歡
歡迎211本科同學，過A區(qū)國家線，A區(qū)非偏遠一本，交叉學科課題組
已經(jīng)有24人回復
-
新疆大學地質(zhì)與礦業(yè)工程學院招生
已經(jīng)有10人回復
-
招調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復
-
0856材料與化工求調(diào)劑！
已經(jīng)有11人回復
-
材料與化工304求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復
-
A區(qū)一本交叉課題組，低分調(diào)劑，招收機械電子信息通信等交叉方向
已經(jīng)有31人回復
-
中科大材料299求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復
-
301求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復
-
材料考研339求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復
-
材料專碩290求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復
2樓2019-05-28 07:20:52
5樓2019-05-28 11:38:25
10樓2019-11-21 11:00:59
簡單回復
2019-05-28 11:33
回復
五星好評 頂一下，感謝分享！
2019-05-28 11:37
回復
頂一下，感謝分享！
yidu016樓
2019-06-02 15:20
回復
五星好評 頂一下，感謝分享！
2019-06-06 06:11
回復
五星好評 頂一下，感謝分享！
2019-06-08 06:32
回復
頂一下，感謝分享！
2019-06-10 05:56
回復
頂一下，感謝分享！
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 guzijing 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專碩290求調(diào)劑 +5 | 杰尼龜aaa 2026-03-04 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 083000，總分284，求調(diào)劑 +3 | 徐yr 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085602 293分求調(diào)劑 +3 | SivanNano. 2026-03-05 | 3/150 |
|
|
[考研] 一志愿山東大學105500藥學專碩，總分302求調(diào)劑 +3 | 五維天空 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +3 | 林小星發(fā)大財 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 376求調(diào)劑 +3 | 王浩然sam 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大080500總分324求調(diào)劑 +3 | jorna 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 一志愿中南大學理學化學
+6
|
15779376950 2026-03-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085601 材料305分求助 +4 | 泡泡郵件 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856材料工程，初試313調(diào)劑 +7 | 賣個關(guān)子吧 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[碩博家園] 2025屆雙非化工碩士畢業(yè)，申博 +4 | 更多的是 2026-02-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +6 | 天下熯 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +3 | 少71.8 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +9 | 滿頭大汗的學生 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085600材料工程一志愿中科大總分312求調(diào)劑 +9 | 吃宵夜1 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
|
[考博] 誠招農(nóng)業(yè)博士 +3 | 心欣向榮 2026-02-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料學碩298分，求調(diào)劑 +6 | wsl111 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +4 | 巴拉巴拉根556 2026-02-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 272求調(diào)劑 +6 | 田智友 2026-02-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
尋找調(diào)劑
+4
|
LYidhsjabdj 2026-02-28 | 4/200 |
|