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ohsehun新蟲 (初入文壇)
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[求助]
比色法測(cè)酶活時(shí)，吸光度值過低應(yīng)該怎么解決？
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【酪氨酸酶液的提取：稱取去皮切碎馬鈴薯 2 g，按 1:5(m/V)的比例加入 10 mL 磷酸鹽緩沖液(0.1 mol/L、pH 6.8)，勻漿，低溫離心 10 min （10000 r/min、 4 ℃ ）， 上清溶液保存于冰浴或冰箱中，2 h 內(nèi)用完。 酶活性的測(cè)定：測(cè)定管加入 1 mL 2 mmol/L 的L-多巴溶液、1.5 mL 磷酸鹽緩沖液(0.1 mol/L、pH 6.8)，充分混勻， 30 ℃ 水浴中溫育 10 min 后，加入 0.5 mL酶提液，充分混勻，在 475 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度度值（OD）。開始前 6 min，每隔 30 s 測(cè)定記錄一次，以后每隔 1 min 測(cè)定記錄一次。依據(jù)直線斜率即可得到酶活力。】 框里的是實(shí)驗(yàn)方法，做到第6分鐘吸光度才達(dá)到了0.1XX，這種情況下，想要增加吸光度，應(yīng)該是在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候把酶提液的體積增加，還是應(yīng)該提取時(shí)把馬鈴薯與緩沖液的體積比降到1:4呀？提前感謝各位大佬！ |
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