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ohsehun新蟲 (初入文壇)
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比色法測酶活時,吸光度值過低應該怎么解決?
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【酪氨酸酶液的提取:稱取去皮切碎馬鈴薯 2 g,按 1:5(m/V)的比例加入 10 mL 磷酸鹽緩沖液(0.1 mol/L、pH 6.8),勻漿,低溫離心 10 min (10000 r/min、 4 ℃ ), 上清溶液保存于冰浴或冰箱中,2 h 內(nèi)用完。 酶活性的測定:測定管加入 1 mL 2 mmol/L 的L-多巴溶液、1.5 mL 磷酸鹽緩沖液(0.1 mol/L、pH 6.8),充分混勻, 30 ℃ 水浴中溫育 10 min 后,加入 0.5 mL酶提液,充分混勻,在 475 nm 波長下測定吸光度度值(OD)。開始前 6 min,每隔 30 s 測定記錄一次,以后每隔 1 min 測定記錄一次。依據(jù)直線斜率即可得到酶活力! 框里的是實驗方法,做到第6分鐘吸光度才達到了0.1XX,這種情況下,想要增加吸光度,應該是在進行檢測的時候把酶提液的體積增加,還是應該提取時把馬鈴薯與緩沖液的體積比降到1:4呀?提前感謝各位大佬! |
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