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[交流]
蒽酮比色法測定蛋白植物存在的問題 已有3人參與
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測定甘蔗和桑葉的可溶性碳水化合物（WSC），多次測量結(jié)果桑葉的WSC高于甘蔗，是否是蛋白的影響，接下來應(yīng)該怎么改善測定方案。附上測定方案： 試劑與標(biāo)準(zhǔn)曲線制作： 蒽酮試劑:稱取0.4g蔥酮溶于100mL88%硫酸中（現(xiàn)配現(xiàn)用）。 ① 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取200g葡萄糖溶于1000mL的容量瓶中，配制成200ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液； ② 取6支干燥潔凈的試管（EP管15mL以上），在試管中分別加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL上述標(biāo)準(zhǔn)溶液，再分別添加1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5mL蒸餾水；對應(yīng)葡萄糖濃度分別為0、20、40、60、80、100ug/mL。 ③分別添加蒽酮試劑5mL,于沸水浴中煮沸10min,取出冷卻，然后在620nm波長處測定OD值，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（擬合度R2 > 0.99）； ?樣品含量的測定: ①稱取粉碎的樣品0.2g置于試管中，加10mL蒸餾水，沸水浴30分鐘，離心獲得提取液，再稀釋100倍待測； ②取1mL稀釋過后的提取液，加入試管中，加蒽酮試劑5mL,于沸水浴中煮沸10min,取出冷卻，然后在620nm波長處測定OD值； ③根據(jù)糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的糖含量。 結(jié)果計(jì)算：WSC=C×100÷10-6×10÷0.2×100% 式中： C：從標(biāo)準(zhǔn)曲線查詢的濃度（ug/mL）；100：稀釋倍數(shù)；10-6：ug換算成g；10：樣品水浴體積；0.2：干物質(zhì)樣 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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4樓2020-02-23 19:38:29
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是不是考慮除蛋白質(zhì)啊，色素和含色氨酸的蛋白質(zhì)對蒽酮比色法測可溶性糖又干擾的。有文獻(xiàn)講，待測液含白蛋白和球蛋白時(shí)，與待測液只含果糖相比，顯色變淺。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2020-09-11 11:01:42
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