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蒽酮比色法測定蛋白植物存在的問題 已有3人參與
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測定甘蔗和桑葉的可溶性碳水化合物(WSC),多次測量結(jié)果桑葉的WSC高于甘蔗,是否是蛋白的影響,接下來應(yīng)該怎么改善測定方案。附上測定方案: 試劑與標(biāo)準(zhǔn)曲線制作: 蒽酮試劑:稱取0.4g蔥酮溶于100mL88%硫酸中(現(xiàn)配現(xiàn)用)。 ① 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取200g葡萄糖溶于1000mL的容量瓶中,配制成200ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液; ② 取6支干燥潔凈的試管(EP管15mL以上),在試管中分別加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL上述標(biāo)準(zhǔn)溶液,再分別添加1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5mL蒸餾水;對應(yīng)葡萄糖濃度分別為0、20、40、60、80、100ug/mL。 ③分別添加蒽酮試劑5mL,于沸水浴中煮沸10min,取出冷卻,然后在620nm波長處測定OD值,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(擬合度R2 > 0.99); ?樣品含量的測定: ①稱取粉碎的樣品0.2g置于試管中,加10mL蒸餾水,沸水浴30分鐘,離心獲得提取液,再稀釋100倍待測; ②取1mL稀釋過后的提取液,加入試管中,加蒽酮試劑5mL,于沸水浴中煮沸10min,取出冷卻,然后在620nm波長處測定OD值; ③根據(jù)糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中的糖含量。 結(jié)果計算:WSC=C×100÷10-6×10÷0.2×100% 式中: C:從標(biāo)準(zhǔn)曲線查詢的濃度(ug/mL);100:稀釋倍數(shù);10-6:ug換算成g;10:樣品水浴體積;0.2:干物質(zhì)樣 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
銀蟲 (正式寫手)
銅蟲 (小有名氣)
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是不是考慮除蛋白質(zhì)啊,色素和含色氨酸的蛋白質(zhì)對蒽酮比色法測可溶性糖又干擾的。有文獻(xiàn)講,待測液含白蛋白和球蛋白時,與待測液只含果糖相比,顯色變淺。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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