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陳姍美眉新蟲 (初入文壇)
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[交流]
求大神指導(dǎo)96孔板做抑菌實(shí)驗(yàn)MIC測定的使用規(guī)范 已有4人參與
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96孔板做抑菌實(shí)驗(yàn)mic測定的使用規(guī)范,用完怎么滅菌?為什么每次測的od值不穩(wěn)定是什么原因 發(fā)自小木蟲Android客戶端 [ Last edited by 小冀- on 2019-2-26 at 10:47 ] |
新蟲 (初入文壇)
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請(qǐng)問用TTC怎么弄呀,我最近也用TTC做的,但是結(jié)果很奇奇怪怪,和理論結(jié)果相反,如果您有時(shí)間,麻煩您幫忙分析一下,謝謝! 請(qǐng)問有個(gè)問題需要請(qǐng)教,就是用96孔板測定藥物的mic,藥物是苯扎氯銨,用DMSO溶解的,藥物濃度從左至右是依次減小的,然后用了TTC作為了顯色劑,后兩排顯色的是DMSO組和陽性對(duì)照組(肉湯和菌液),他們兩組顯色了,最后還測定了每組的od值,有幾個(gè)奇怪的現(xiàn)象,1. 就是od顯示的是藥物濃度大的反而長菌了,od值反而大,肉眼也可以看見有菌的生長,從左至右的od卻依次減小,且接近于陰性對(duì)照組(只有肉湯培養(yǎng)基和顯色劑),正常來講應(yīng)該是od值依次增大,因?yàn)殡S著藥物濃度的減小,抑制菌的能力也相對(duì)減弱。2.第二點(diǎn)奇怪的是,除了陽性對(duì)照組和dmso組顯色了,其余的都沒有顯色,實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是,第一組藥物長菌了,但是沒顯色。顯色劑的原理是,檢測機(jī)制在于TTC本身可作為一種氧化還原指示劑,活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶(尤其是線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶)可以將TTC還原為紅色甲臢化合物TPF(1,3,5-triphenylformazan)。對(duì)于種子或者植物組織來說,染色結(jié)果為活組織被染成不同程度的紅色,死組織或者無生命力的組織不著色。對(duì)于缺血梗塞組織,因組織壞死脫氫酶活力喪失呈現(xiàn)蒼白色,而正常組織呈深紅色。TTC常用的染色濃度為2%(w/v)(貨號(hào):AG3005),也可根據(jù)組織類型做濃度的適當(dāng)調(diào)整。就是明明陽性對(duì)照組都顯色了,加入藥物的為什么不顯色。求大神指點(diǎn)。。! |
木蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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96孔板我們實(shí)驗(yàn)室有做,我們用的是TTC染色法,不知道你說的使用規(guī)范是使用方法嗎? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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