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陳姍美眉新蟲 (初入文壇)
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[交流]
求大神指導(dǎo)96孔板做抑菌實驗MIC測定的使用規(guī)范 已有4人參與
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96孔板做抑菌實驗mic測定的使用規(guī)范，用完怎么滅菌？為什么每次測的od值不穩(wěn)定是什么原因 發(fā)自小木蟲Android客戶端 [ Last edited by 小冀- on 2019-2-26 at 10:47 ] |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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請問用TTC怎么弄呀，我最近也用TTC做的，但是結(jié)果很奇奇怪怪，和理論結(jié)果相反，如果您有時間，麻煩您幫忙分析一下，謝謝！ 請問有個問題需要請教，就是用96孔板測定藥物的mic，藥物是苯扎氯銨，用DMSO溶解的，藥物濃度從左至右是依次減小的，然后用了TTC作為了顯色劑，后兩排顯色的是DMSO組和陽性對照組（肉湯和菌液），他們兩組顯色了，最后還測定了每組的od值，有幾個奇怪的現(xiàn)象，1. 就是od顯示的是藥物濃度大的反而長菌了，od值反而大，肉眼也可以看見有菌的生長，從左至右的od卻依次減小，且接近于陰性對照組（只有肉湯培養(yǎng)基和顯色劑），正常來講應(yīng)該是od值依次增大，因為隨著藥物濃度的減小，抑制菌的能力也相對減弱。2.第二點奇怪的是，除了陽性對照組和dmso組顯色了，其余的都沒有顯色，實驗的結(jié)果是，第一組藥物長菌了，但是沒顯色。顯色劑的原理是，檢測機(jī)制在于TTC本身可作為一種氧化還原指示劑，活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶（尤其是線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶）可以將TTC還原為紅色甲臢化合物TPF（1,3,5-triphenylformazan）。對于種子或者植物組織來說，染色結(jié)果為活組織被染成不同程度的紅色，死組織或者無生命力的組織不著色。對于缺血梗塞組織，因組織壞死脫氫酶活力喪失呈現(xiàn)蒼白色，而正常組織呈深紅色。TTC常用的染色濃度為2%（w/v）(貨號：AG3005)，也可根據(jù)組織類型做濃度的適當(dāng)調(diào)整。就是明明陽性對照組都顯色了，加入藥物的為什么不顯色。求大神指點�。。�！ |
5樓2022-07-19 12:08:48
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