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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 細胞科學 » 求助一氧化氮含量檢測問題
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19920311yrr新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助一氧化氮含量檢測問題 已有1人參與
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一氧化氮含量檢測問題 使用的DAF-FM DA(NO熒光探針），檢測樣品為藻類，問題未作處理的細胞內NO含量變化幅度較大，與實驗組差異不顯著 具體操作：收集細胞后裝載探針：按照1:1000比例，用試劑盒提供的DAF-FM DA稀釋液稀釋DAF-FM DA，使終濃度為5微摩爾/升。細胞收集后，用稀釋好的DAF-FM DA重懸細胞，細胞濃度為一百萬至二千萬/毫升，37℃細胞培養(yǎng)箱內孵育30分鐘。上述操作在離心管內進行。放置在搖床上使藥品混勻，使探針和細胞充分接觸。用PBS(pH7.4)洗滌細胞三次，以充分去除未進入細胞內的DAF-FM DA。用熒光酶標儀檢測。使用495nm激發(fā)波長，515nm發(fā)射波長，逐時間點檢測刺激前后熒光的強弱。 |
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2樓2019-02-26 11:03:19
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