 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 970 | 回復: 1 | |||
[交流]
Cas9做肺癌細胞的基因敲除，用體外導入Cas9蛋白的效率如何？
|
|
CRISPR(clustered,regularly interspaced,short palindromic repeats)是一種來自細菌降解入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫機制。在細菌及古細菌中，CRISPR系統(tǒng)共分成3類，其中Ⅰ類和Ⅲ類需要多種CRISPR相關蛋白（Cas蛋白）共同發(fā)揮作用，而Ⅱ類系統(tǒng)只需要一種Cas蛋白即可，這為其能夠廣泛應用提供了便利條件。目前，來自Streptococcus pyogenes的CRISPR/Cas9系統(tǒng)應用最為廣泛。 Cas9蛋白（含有兩個核酸酶結構域，可以分別切割DNA兩條單鏈。Cas9首先與crRNA及tracrRNA結合成復合物，然后通過PAM序列結合并侵入DNA，形成RNA-DNA復合結構，進而對目的DNA雙鏈進行切割，使DNA雙鏈斷裂。 研究人員為了將CRISPR/Cas9技術發(fā)展為高效的基因打靶工具，又進行了優(yōu)化和改造。Cong, L.等人在不影響系統(tǒng)效率的情況下，將crRNA和tracrRNA融合為一條RNA。通過這種簡化，CRISPR/Cas9系統(tǒng)現(xiàn)僅包括兩個元素：Cas9蛋白和sgRNA（single guide RNA）。因此現(xiàn)在人們將CRISPR/Cas9技術也稱為Cas9/sgRNA技術。 最近做到了肺癌細胞某段基因的敲除，前面的師兄師姐都是用的轉cas9質粒進細胞表達的方式做的實驗。老師讓我試一下通過體外導入Cas9蛋白的方式來進行。有用過這個方法做的嗎？是通過轉染試劑直接導入嗎? 然后在丁xx通上找到了一家做cas系列蛋白很全的商家， https://www.biomart.cn/63867/index.htm cas9，dcas9，cas12a，cas13a都有。這幾個蛋白的區(qū)別有人知道嗎？ |
回復此樓» 猜你喜歡
新疆大學地質與礦業(yè)工程學院招生
已經有32人回復
-
0856材料與化工353分求調劑
已經有4人回復
-
282分材料專業(yè)求調劑院校
已經有13人回復
-
315食品工程求調劑
已經有5人回復
-
環(huán)境調劑
已經有3人回復
-
接受26屆調劑生
已經有20人回復
-
考研材料與化工，求調劑
已經有3人回復
-
歡迎211本科同學，過A區(qū)國家線，A區(qū)非偏遠一本，交叉學科課題組
已經有35人回復
-
304求調劑（085602一志愿985）
已經有4人回復
-
294 英二數二物化 求調劑
已經有6人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
tongbujing 
禁言 (初入文壇)
|
本帖內容被屏蔽 |
2樓2019-06-16 16:11:08
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 小蟲草菌 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 考研材料與化工，求調劑 +3 | 戲精丹丹丹 2026-03-09 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 264求調劑 +4 | thext 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 288求調劑 +9 | 王曉陽- 2026-03-09 | 11/550 |
|
|
|
[碩博家園] 2026級碩士研究生招生/調劑 +3 | 知足常樂的樂 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0832食品科學與工程293調劑 +3 | 東東不東 2026-03-07 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 313分生物學求調劑 +4 | Yyt楊1 2026-03-09 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 26申博自薦 +9 | 烷基八氮- 2026-03-06 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 0703化學調劑 +5 | G212 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 267化工調劑求助 +7 | 聰少OZ 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工（高分子）290分求調劑 +9 | wengyujian 2026-03-04 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 化學專業(yè)調劑 +5 | 好好好1233 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 材料工程調劑
+6
|
zbcm_zbcm 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工354調劑 +4 | Lucy-xiao 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化工282求調劑一志愿211 +5 | NA0912 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工，291，求調劑 +7 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-05 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程 求調劑 +7 | xiiiia 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿武漢理工大學-085602-總分296分-求調劑 +7 | 紫川葡柚 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿985材料與化工 326分求調劑 +3 | Hz795795 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿西交大材料學碩 346 求調劑 +3 | zju51 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復試調劑 +4 | 杰尼龜aaa 2026-03-03 | 4/200 |
|