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kidd0115金蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白質(zhì)標(biāo)記熒光侵染細(xì)胞的技術(shù)問題
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大家好，我想用Cy3-NHS標(biāo)記一個(gè)蛋白質(zhì)混合物刺激細(xì)胞觀察其亞細(xì)胞定位。按照說明書做了，3kD超濾管離心了好幾次，得到的蛋白濃度測(cè)量發(fā)現(xiàn)損失很大。然后和巨噬細(xì)胞共同孵育4h，拍熒光時(shí)候只看到dapi染的細(xì)胞核，看不到目的蛋白在細(xì)胞內(nèi)發(fā)出熒光，而光學(xué)顯微鏡白光居然可以看到像染料沉淀一樣肉眼可見的玫瑰色在細(xì)胞外面一大坨。想問下誰有經(jīng)驗(yàn)可以分享？ 或者詳細(xì)告知閣下做過熒光標(biāo)記蛋白的具體步驟，我看看我哪里做錯(cuò)？ |
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15737926255
銀蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 神經(jīng)精神藥物藥理
2樓2019-01-18 12:20:28
kidd0115
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1129.7
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- 帖子: 128
- 在線: 35.1小時(shí)
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- 注冊(cè): 2008-02-16
- 專業(yè): 獸醫(yī)寄生蟲學(xué)
3樓2019-01-19 10:22:49
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