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kidd0115金蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白質(zhì)標(biāo)記熒光侵染細胞的技術(shù)問題
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大家好，我想用Cy3-NHS標(biāo)記一個蛋白質(zhì)混合物刺激細胞觀察其亞細胞定位。按照說明書做了，3kD超濾管離心了好幾次，得到的蛋白濃度測量發(fā)現(xiàn)損失很大。然后和巨噬細胞共同孵育4h，拍熒光時候只看到dapi染的細胞核，看不到目的蛋白在細胞內(nèi)發(fā)出熒光，而光學(xué)顯微鏡白光居然可以看到像染料沉淀一樣肉眼可見的玫瑰色在細胞外面一大坨。想問下誰有經(jīng)驗可以分享？ 或者詳細告知閣下做過熒光標(biāo)記蛋白的具體步驟，我看看我哪里做錯？ |
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銀蟲 (正式寫手)
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2樓2019-01-18 12:20:28
kidd0115
金蟲 (小有名氣)
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3樓2019-01-19 10:22:49
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