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kidd0115金蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白質(zhì)標(biāo)記熒光的技術(shù)問題
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大家好，我想用Cy3-NHS標(biāo)記一個蛋白質(zhì)混合物刺激細(xì)胞觀察其亞細(xì)胞定位。按照說明書做了，3kD超濾管離心了好幾次，得到的蛋白濃度測量發(fā)現(xiàn)損失很大。然后和巨噬細(xì)胞共同孵育4h，拍熒光時候只看到dapi染的細(xì)胞核，看不到目的蛋白在細(xì)胞內(nèi)發(fā)出熒光，而光學(xué)顯微鏡白光居然可以看到像染料沉淀一樣肉眼可見的玫瑰色在細(xì)胞外面一大坨。想問下誰有經(jīng)驗可以分享？ 或者詳細(xì)告知閣下做過熒光標(biāo)記蛋白的具體步驟，我看看我哪里做錯？ [ 發(fā)自手機(jī)版 http://m.gaoyang168.com/3g ] |
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kidd0115
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2樓2019-01-19 10:23:27
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