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kidd0115金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
蛋白質(zhì)標(biāo)記熒光的技術(shù)問(wèn)題
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大家好，我想用Cy3-NHS標(biāo)記一個(gè)蛋白質(zhì)混合物刺激細(xì)胞觀察其亞細(xì)胞定位。按照說(shuō)明書(shū)做了，3kD超濾管離心了好幾次，得到的蛋白濃度測(cè)量發(fā)現(xiàn)損失很大。然后和巨噬細(xì)胞共同孵育4h，拍熒光時(shí)候只看到dapi染的細(xì)胞核，看不到目的蛋白在細(xì)胞內(nèi)發(fā)出熒光，而光學(xué)顯微鏡白光居然可以看到像染料沉淀一樣肉眼可見(jiàn)的玫瑰色在細(xì)胞外面一大坨。想問(wèn)下誰(shuí)有經(jīng)驗(yàn)可以分享？ 或者詳細(xì)告知閣下做過(guò)熒光標(biāo)記蛋白的具體步驟，我看看我哪里做錯(cuò)？ [ 發(fā)自手機(jī)版 http://m.gaoyang168.com/3g ] |
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kidd0115
金蟲(chóng) (小有名氣)
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- 專業(yè): 獸醫(yī)寄生蟲(chóng)學(xué)
2樓2019-01-19 10:23:27
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