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[求助]
硫酸鹽還原菌種群測(cè)定 已有1人參與
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本人對(duì)微生物不是很了解，有個(gè)問(wèn)題想請(qǐng)教各位大神幫幫忙 。本人實(shí)驗(yàn)將污水廠剩余污泥接種至硫酸鹽還原菌專(zhuān)屬培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，用丙酸鈉作為碳源。培養(yǎng)液配方為：無(wú)水硫酸鈉0.5g/L、氯化銨1.0g/L、氯化鈣0.1g/L、磷酸氫二鉀0.5g/L、七水合硫酸鎂2.0g/L、丙酸鈉3.5g/L、酵母浸膏1.0g/L、硫酸亞鐵銨0.5g/L、抗壞血酸0.5g/L，調(diào)pH至7.0，厭氧30～37℃靜置培養(yǎng)。目前硫酸鹽還原效率感覺(jué)可以了，想測(cè)定其中微生物的種群分布.因?yàn)闆](méi)有滅菌處理，我覺(jué)得其中除了硫酸鹽還原菌，應(yīng)該還會(huì)有其他一些微生物,所以想用細(xì)菌的16s rRNA通用引物測(cè)種群分布，我查了一些文獻(xiàn)，都是用乙酸鈉，乳酸鈉，蔗糖等作為碳源，檢測(cè)區(qū)間使用V1-V3，V4，V4-V5，全區(qū)間的都有，我找文獻(xiàn)好慢  不知道使用丙酸鈉作為碳源，檢測(cè)哪個(gè)區(qū)間會(huì)更好，或者有沒(méi)有其他更好的辦法。請(qǐng)教懂得大神啊，救救我這種小白吧！感激不盡 |
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6樓2019-04-26 12:26:23
ucmiao
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2樓2019-01-08 06:56:02
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3樓2019-01-08 22:40:25
remax520
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【答案】應(yīng)助回帖
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要看你自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模绻莾H僅想看其中的微生物種類(lèi)，那就用通用引物擴(kuò)增看看種類(lèi)。如果是已經(jīng)富集過(guò)的，富集的都是硫酸還原菌，用通用引物測(cè)定沒(méi)有問(wèn)題的。如果使用功能基因測(cè)的話，有可能因?yàn)樽⑨尩膯?wèn)題，導(dǎo)致物種種類(lèi)不準(zhǔn)確，因?yàn)楣δ芑虍吘共皇怯糜谖锓N分類(lèi)的生物標(biāo)記。 |
4樓2019-02-02 15:28:48
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