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[求助]
硫酸鹽還原菌種群測定 已有1人參與
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本人對微生物不是很了解,有個問題想請教各位大神幫幫忙 。本人實驗將污水廠剩余污泥接種至硫酸鹽還原菌專屬培養(yǎng)液中進行培養(yǎng),用丙酸鈉作為碳源。培養(yǎng)液配方為:無水硫酸鈉0.5g/L、氯化銨1.0g/L、氯化鈣0.1g/L、磷酸氫二鉀0.5g/L、七水合硫酸鎂2.0g/L、丙酸鈉3.5g/L、酵母浸膏1.0g/L、硫酸亞鐵銨0.5g/L、抗壞血酸0.5g/L,調pH至7.0,厭氧30~37℃靜置培養(yǎng)。目前硫酸鹽還原效率感覺可以了,想測定其中微生物的種群分布.因為沒有滅菌處理,我覺得其中除了硫酸鹽還原菌,應該還會有其他一些微生物,所以想用細菌的16s rRNA通用引物測種群分布,我查了一些文獻,都是用乙酸鈉,乳酸鈉,蔗糖等作為碳源,檢測區(qū)間使用V1-V3,V4,V4-V5,全區(qū)間的都有,我找文獻好慢 不知道使用丙酸鈉作為碳源,檢測哪個區(qū)間會更好,或者有沒有其他更好的辦法。請教懂得大神啊,救救我這種小白吧!感激不盡 |
銀蟲 (小有名氣)
銅蟲 (小有名氣)
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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要看你自己的實驗目的,如果是僅僅想看其中的微生物種類,那就用通用引物擴增看看種類。如果是已經富集過的,富集的都是硫酸還原菌,用通用引物測定沒有問題的。如果使用功能基因測的話,有可能因為注釋的問題,導致物種種類不準確,因為功能基因畢竟不是用于物種分類的生物標記。 |
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