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快快樂(lè)樂(lè)學(xué)新蟲(chóng) (小有名氣)
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材料經(jīng)全譜測(cè)到了多種黃酮類物質(zhì)，自己提取的黃酮經(jīng)高效液相卻只... 已有4人參與
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材料經(jīng)全譜測(cè)到了多種黃酮類物質(zhì)，自己提取的黃酮經(jīng)高效液相卻只檢測(cè)到2種，這是為什么？ 我先用石油醚對(duì)材料粉末進(jìn)行了脫脂脫色處理(脫色不完全)，再稱取1g粉末用70％的甲醇提取酚類物質(zhì)，經(jīng)旋蒸濃縮后(不是油膏狀，還是液體)用50％的二甲基亞砜(蒸餾水＋二甲基亞砜)定容為15mL，直接送去測(cè)黃酮，結(jié)果只測(cè)到了兩種，求助前輩們這是我提取的濃度太低了嗎，還是有其他什么原因會(huì)造成這樣？對(duì)方要求我重新送樣過(guò)去，我不知道該怎么再優(yōu)化了，請(qǐng)求各位大神的指點(diǎn)。 這個(gè)是出錢(qián)讓別人測(cè)的，這次測(cè)不出來(lái)就相當(dāng)于錢(qián)白費(fèi)了，一般高效液相除了濃度太低檢測(cè)不出來(lái)之外還有會(huì)有什么原因? 為什么提取多酚類物質(zhì)要旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，目的只是增加它的濃度嗎，那我在做提取條件優(yōu)化的時(shí)候有好多樣需要旋蒸，可以不旋蒸直接定容之后在分光光度計(jì)上測(cè)嗎，一個(gè)剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的童鞋，請(qǐng)求各位幫忙分析一下。 @starseacow 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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2樓2019-01-07 08:26:18
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3樓2019-01-07 09:12:34
wimm36
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【答案】應(yīng)助回帖
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1黃酮類化合物的溶解性千差萬(wàn)別，基礎(chǔ)的黃酮類化合物一般都是溶于甲醇乙醇等簡(jiǎn)單有機(jī)物的，有些也可以溶于油脂等其他高分子有機(jī)物中。成苷后一般水溶性會(huì)增加，但是也并不一定。 2黃酮類化合物基本結(jié)構(gòu)中有兩個(gè)苯環(huán)，電子共軛效應(yīng)比較明顯。比較通用的檢測(cè)波長(zhǎng)在250-340之間（一般在280-320左右）。而自然界中具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的物質(zhì)非常之多，具有共軛結(jié)構(gòu)的也數(shù)不勝數(shù)，有很多物質(zhì)可以在這個(gè)檢測(cè)范圍內(nèi)有明顯吸收峰，不足為奇�？恳合辔辗鍣z測(cè)黃酮，至少在質(zhì)譜上定性，然后才能用。 3黃酮類化合物的含量，在不同植物之間，不同部位等原因都會(huì)不同。而且一般來(lái)說(shuō)，含量都很低。 所以 1更換不同的提取液逐級(jí)提取，如果有你重點(diǎn)感興趣的黃酮類化合物，最好還是只研究感興趣的。一般植物中有十幾，幾十種黃酮化合物及其衍生物很正常。 然后對(duì)逐級(jí)提取液進(jìn)行分別檢測(cè)，別忘了跑一下對(duì)照，去掉空白對(duì)照出現(xiàn)的吸收峰。對(duì)了，水提也應(yīng)該嘗試一下。 確定最佳提取條件后，再做后面的分離送樣 2用LCMS跑，根據(jù)分子量，先定性，看看可能有什么東西，再?zèng)Q定做不做后續(xù)實(shí)驗(yàn) 別忘了做空白對(duì)照 3試驗(yàn)用的量也挺重要的，如果有前人做過(guò)類似實(shí)驗(yàn)，你最好靈活探索一下最佳用量和取材部位，處理方法。畢竟文章，理解力，實(shí)際操作三者之間很難一致。 最后，祝好運(yùn)。 |
6樓2019-02-14 15:36:16
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7樓2019-02-24 11:42:23
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