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材料經(jīng)全譜測到了多種黃酮類物質(zhì),自己提取的黃酮經(jīng)高效液相卻只... 已有4人參與
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材料經(jīng)全譜測到了多種黃酮類物質(zhì),自己提取的黃酮經(jīng)高效液相卻只檢測到2種,這是為什么? 我先用石油醚對材料粉末進行了脫脂脫色處理(脫色不完全),再稱取1g粉末用70%的甲醇提取酚類物質(zhì),經(jīng)旋蒸濃縮后(不是油膏狀,還是液體)用50%的二甲基亞砜(蒸餾水+二甲基亞砜)定容為15mL,直接送去測黃酮,結(jié)果只測到了兩種,求助前輩們這是我提取的濃度太低了嗎,還是有其他什么原因會造成這樣?對方要求我重新送樣過去,我不知道該怎么再優(yōu)化了,請求各位大神的指點。 這個是出錢讓別人測的,這次測不出來就相當于錢白費了,一般高效液相除了濃度太低檢測不出來之外還有會有什么原因? 為什么提取多酚類物質(zhì)要旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,目的只是增加它的濃度嗎,那我在做提取條件優(yōu)化的時候有好多樣需要旋蒸,可以不旋蒸直接定容之后在分光光度計上測嗎,一個剛進實驗室的童鞋,請求各位幫忙分析一下。 @starseacow 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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1黃酮類化合物的溶解性千差萬別,基礎的黃酮類化合物一般都是溶于甲醇乙醇等簡單有機物的,有些也可以溶于油脂等其他高分子有機物中。成苷后一般水溶性會增加,但是也并不一定。 2黃酮類化合物基本結(jié)構(gòu)中有兩個苯環(huán),電子共軛效應比較明顯。比較通用的檢測波長在250-340之間(一般在280-320左右)。而自然界中具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的物質(zhì)非常之多,具有共軛結(jié)構(gòu)的也數(shù)不勝數(shù),有很多物質(zhì)可以在這個檢測范圍內(nèi)有明顯吸收峰,不足為奇?恳合辔辗鍣z測黃酮,至少在質(zhì)譜上定性,然后才能用。 3黃酮類化合物的含量,在不同植物之間,不同部位等原因都會不同。而且一般來說,含量都很低。 所以 1更換不同的提取液逐級提取,如果有你重點感興趣的黃酮類化合物,最好還是只研究感興趣的。一般植物中有十幾,幾十種黃酮化合物及其衍生物很正常。 然后對逐級提取液進行分別檢測,別忘了跑一下對照,去掉空白對照出現(xiàn)的吸收峰。對了,水提也應該嘗試一下。 確定最佳提取條件后,再做后面的分離送樣 2用LCMS跑,根據(jù)分子量,先定性,看看可能有什么東西,再決定做不做后續(xù)實驗 別忘了做空白對照 3試驗用的量也挺重要的,如果有前人做過類似實驗,你最好靈活探索一下最佳用量和取材部位,處理方法。畢竟文章,理解力,實際操作三者之間很難一致。 最后,祝好運。 |

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