 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2745 | 回復(fù): 10 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
炸魚(yú)條yy新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
RCA滾環(huán)擴(kuò)增中用到的酶的問(wèn)題 已有1人參與
|
|
| 我看到都是用phi29這種酶來(lái)做滾還擴(kuò)增，用KF聚合酶可以做嗎，以及這兩種酶之間有什么區(qū)別？有做過(guò)的前輩可以分享一下嗎。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
成果系統(tǒng)訪問(wèn)量大，請(qǐng)15分鐘后再?lài)L試。由此給您造成的不便，敬請(qǐng)諒解。
已經(jīng)有19人回復(fù)
-
A區(qū)一本交叉課題組，低分調(diào)劑，招收機(jī)械電子信息通信等交叉方向
已經(jīng)有52人回復(fù)
-
085701環(huán)境工程317分求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
材料工程085601調(diào)劑求老師收留
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿西工大材料學(xué)，英一數(shù)二總分321分，求調(diào)劑。
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
288求調(diào)劑085600材料與化工
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
材料科學(xué)（0805）338 求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料化工求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
第一志愿上海大學(xué)，專(zhuān)業(yè)化學(xué)工程與技術(shù)，總分288，求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
新疆大學(xué)地質(zhì)與礦業(yè)工程學(xué)院招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
SX花開(kāi)有聲
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 56.8
- 帖子: 26
- 在線: 8.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 7734388
- 注冊(cè): 2018-01-06
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 生化分析及生物傳感
3樓2019-10-09 09:08:34
Tiriosh
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 84 (初中生)
- 金幣: 20347.3
- 散金: 3123
- 紅花: 66
- 帖子: 3674
- 在線: 5881.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2417244
- 注冊(cè): 2013-04-14
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生化分析及生物傳感
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
除了一般的DNA聚合外，RCA最大的特點(diǎn)是需要聚合酶持續(xù)的把之前生成的雙開(kāi)“頂開(kāi)”，也就是說(shuō)需要具有strand displacement性能。根據(jù)NEB官網(wǎng)信息，KF是Moderate strand displacement activity，感覺(jué)應(yīng)該可以做RCA但是可能效率會(huì)有影響。與之相對(duì)，phi29是strong strand displacement activity。 做RCA用的酶，除了strand displacement性能之外還會(huì)考慮exonuclease activity性能，是否具備這一性能對(duì)于RCA的實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)有影響。KF不具備外切酶活性（以NEB官網(wǎng)說(shuō)明為準(zhǔn)，來(lái)源不同話可能性能有所不同）那么對(duì)primer的處理就需要保證其3'端是結(jié)核在circular tempalte上，通常的做法是用外切酶trim一下，這也要看你的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)咯。 此外，phi29的一個(gè)很大的問(wèn)題是其最適溫度是30°，所以反應(yīng)速度會(huì)慢一些。如果你是處于提高反應(yīng)溫度考慮而換酶的話，推薦你使用EquiPhi29，是phi29的熱穩(wěn)定版。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
炸魚(yú)條yy2樓2019-10-08 20:48:04
Tiriosh
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 84 (初中生)
- 金幣: 20347.3
- 散金: 3123
- 紅花: 66
- 帖子: 3674
- 在線: 5881.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2417244
- 注冊(cè): 2013-04-14
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生化分析及生物傳感
4樓2019-10-09 14:53:14
炸魚(yú)條yy
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 56.5
- 帖子: 7
- 在線: 18.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 6658507
- 注冊(cè): 2017-06-01
- 專(zhuān)業(yè): 生化分析及生物傳感
5樓2019-10-11 14:50:32
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
材料325求調(diào)劑
 30+6
|
mariusuki 2026-03-02 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 中科大材料299求調(diào)劑 +8 | DAIjiayo 2026-03-05 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +10 | ounce. 2026-03-04 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)專(zhuān)業(yè)調(diào)劑 +5 | 好好好1233 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 280分 +13 | yyqqhh 2026-03-03 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +7 | 月色c 2026-03-05 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 302材料工程求調(diào)劑 +7 | Doleres 2026-03-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué) 280 一志愿太原理工 求調(diào)劑 +8 | 拾玖壹 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +3 | 是樂(lè)渝哇 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 沒(méi)有青基直接申請(qǐng)面上，感覺(jué)自己瘋了 +6 | kevin63t 2026-03-02 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 一志愿武漢理工大學(xué)-085602-總分296分-求調(diào)劑 +7 | 紫川葡柚 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +4 | xuyuan111 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0855機(jī)械工程324求調(diào)劑 +3 | 鄭SK 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 熬夜的貓頭鷹 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 本科太原理工采礦工程，求調(diào)劑 +3 | onlx 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703 總分319求調(diào)劑 +4 | Xinyuu 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 267求調(diào)劑 +6 | 釣魚(yú)佬as 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料工程求調(diào)劑 +3 | 1431251 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856材料調(diào)劑 +5 | 沿岸有貝殼OUC 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 誠(chéng)招農(nóng)業(yè)博士 +3 | 心欣向榮 2026-02-28 | 3/150 |
|