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發(fā)酵染菌問(wèn)題 已有4人參與
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之前發(fā)酵出現(xiàn)問(wèn)題,大概率是空氣濾芯問(wèn)題,換了之后就沒(méi)事了,這次換了兩次濾芯都還是染菌。但奇怪的是,有時(shí)好有時(shí)壞(壞的比較多),到底是哪問(wèn)題,種子液鏡檢過(guò)也培養(yǎng)過(guò)沒(méi)問(wèn)題。現(xiàn)打算空培試下,B罐3000L那么大,請(qǐng)問(wèn)要怎么空培,我做的是屎腸球菌 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
金蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (著名寫手)
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染的球菌還是桿菌?或者就是噬菌體?發(fā)酵液平板劃線找出雜菌的菌落鏡檢下。 3m3的罐子染菌還是比較好查的。設(shè)備問(wèn)題閥門是否內(nèi)漏、冷卻管是否穿孔、設(shè)備清潔是否到位、物料是否結(jié)塊、滅菌操作是規(guī)范?张嗄茯(yàn)證設(shè)備是不是有問(wèn)題,0.3%——1%葡萄糖,少加點(diǎn)硫酸銨、磷酸二氫鉀,有條件加點(diǎn)酵母膏,調(diào)下PH。 |
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閥門沒(méi)漏,消毒的同事也說(shuō)沒(méi)問(wèn)題。我也驗(yàn)證過(guò)不加菌種是沒(méi)問(wèn)題的,就是從種子罐移到發(fā)酵罐時(shí)就出問(wèn)題了,但搖床培養(yǎng)出來(lái)的不是我們經(jīng)常染的菌,不是每批都?jí),有好有壞,沒(méi)有專業(yè)的人指點(diǎn)頭都大了 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
木蟲(chóng) (著名寫手)
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我是做大腸發(fā)酵大生產(chǎn)的,360m3罐。這邊是這樣監(jiān)測(cè)無(wú)菌的 1、種子罐消后接種前培養(yǎng)基取肉湯培養(yǎng)。 2、種子罐移種前取種子液涂平板劃線。 3、發(fā)酵罐接種前培養(yǎng)基取肉湯培養(yǎng)。 4、發(fā)酵過(guò)程間隔12h取發(fā)酵液涂平板劃線。 5、補(bǔ)料消后也是要取肉湯培養(yǎng)的。 必須先找到染菌的時(shí)間點(diǎn)縮小排查范圍。 比如你種子罐移種前的平板劃線是沒(méi)問(wèn)題的,發(fā)酵罐消后接前的肉湯也是沒(méi)問(wèn)題的。然后剛移進(jìn)去幾個(gè)小時(shí)取樣平板就有雜菌了,那大概率就移種過(guò)程有問(wèn)題。 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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移種過(guò)程中注意種子罐保死壓,不能空壓,尾氣關(guān)死,大罐盡量低壓,尾氣最好加個(gè)過(guò)濾器。有可能就是發(fā)酵罐尾氣倒流造成的污染,現(xiàn)在發(fā)酵系統(tǒng)很多人忽視尾氣這一塊,多套發(fā)酵罐都是串聯(lián)共同一個(gè)尾氣管道 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)
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