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畢合生物2024銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
生物試劑的保鮮秘籍🧪 - 延長使用壽命的小技巧
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1️⃣ 不同類型試劑的專屬保存條件 酶類試劑 酶類可是實(shí)驗(yàn)室里的"嬌貴公主"！大多數(shù)酶需要-20℃甚至-80℃保存，而且絕對(duì)不能反復(fù)凍融！我現(xiàn)在都會(huì)把新買的限制性內(nèi)切酶、DNA聚合酶等分裝成小份（10-20μl/管），這樣每次實(shí)驗(yàn)只取需要的量，避免整瓶反復(fù)凍融失活。 抗體寶貝 •一抗：通常-20℃長期保存，4℃可存1-2周 •二抗：熒光標(biāo)記的抗體必須嚴(yán)格遮光，否則熒光團(tuán)會(huì)迅速失活 •小tips：抗體加入50%甘油，能有效防止凍融過程中蛋白質(zhì)變性！ 培養(yǎng)基 自制培養(yǎng)基通常4℃保存，但加入血清后保質(zhì)期會(huì)大大縮短！我一般會(huì)在培養(yǎng)基瓶上貼標(biāo)簽寫明配置日期和有效期，一般不超過1個(gè)月。小tips：觀察顏色變化是判斷培養(yǎng)基是否變質(zhì)的好方法！ 染料試劑 這可是我踩過最大的坑！去年我忘記將DAPI遮光保存，結(jié)果導(dǎo)致整個(gè)細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)混亂，足足耽誤了一周時(shí)間重做實(shí)驗(yàn)...所以染料類試劑請(qǐng)一定記得： •大多數(shù)染料需要4℃遮光保存 •熒光染料如FITC、TRITC等對(duì)光極其敏感 •使用棕色或錫箔紙包裹，避免任何光照！ 2️⃣ 防光、防潮、防污染三大法寶 防光小技巧 •熒光試劑全程遮光，可用鋁箔紙包裹管子或使用棕色離心管 •實(shí)驗(yàn)室購置專門的遮光盒，分類存放敏光試劑 •減少熒光試劑暴露在強(qiáng)光下的時(shí)間，操作時(shí)盡量避開窗戶或強(qiáng)光區(qū) 防潮絕招 濕度是試劑的隱形殺手！對(duì)于那些吸濕性強(qiáng)的試劑（如DTT、瓊脂糖粉末等），我會(huì)： •加入小包干燥劑到試劑瓶中（注意不要直接接觸試劑） •使用密封性好的塑料容器二次保存 •存放在有溫控的干燥環(huán)境中，避免冰箱取出時(shí)的冷凝水影響 防污染技巧 •RNA實(shí)驗(yàn)的試劑單獨(dú)存放，避免RNase污染 •蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)的緩沖液加入抑菌劑（如疊氮鈉，但注意其毒性！） •頻繁使用的試劑分裝成小份，減少污染幾率 3️⃣ 試劑有效期判斷與延長使用壽命的小竅門 真相來了！很多試劑其實(shí)不必嚴(yán)格按照說明書上的有效期丟棄！以下是我的實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)： •DNA酶和RNA酶：通過測(cè)試活性而非看日期判斷是否還能用 •抗體：超過有效期可通過增加使用濃度來補(bǔ)償效價(jià)下降 •PCR引物：干粉-20℃可以保存多年，遠(yuǎn)超說明書標(biāo)注的期限 •小竅門：定期做陽性對(duì)照測(cè)試，確認(rèn)試劑活性而非盲目丟棄 那次我差點(diǎn)丟棄的"過期"限制性內(nèi)切酶，結(jié)果測(cè)試后發(fā)現(xiàn)活性尚好，節(jié)省了課題組近千元經(jīng)費(fèi)！ 4️⃣ 開封后試劑的正確保存步驟 試劑開封是加速其失效的關(guān)鍵時(shí)刻！請(qǐng)一定要做到： 1.記錄開封日期（我都會(huì)在瓶身貼mini標(biāo)簽） 2.檢查是否需要更改存儲(chǔ)條件（有些試劑開封后需從室溫轉(zhuǎn)為冷藏） 3.確保瓶蓋密封良好（尤其是揮發(fā)性試劑如β-巰基乙醇，我會(huì)用封口膜再包一層） 4.某些試劑（如Western顯影液）開封后應(yīng)分裝，避免整瓶污染 5.抗體開封后添加抗菌劑（如0.02%疊氮鈉）延長保質(zhì)期 5️⃣ 試劑失效的識(shí)別方法 如何判斷手中的試劑是否已經(jīng)"陣亡"？這是我總結(jié)的快速識(shí)別法： •溶液類：觀察有無沉淀、混濁、顏色異�；虍愇� •酶類：做簡單的活性測(cè)試（如瓊脂糖凝膠電泳檢查酶切效果） •抗體：做稀釋梯度測(cè)試，看能否獲得特異性信號(hào) •培養(yǎng)基：pH指示劑變色或出現(xiàn)渾濁都表明已被污染 •熒光染料：可在廢棄樣本上快速測(cè)試熒光強(qiáng)度 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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