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畢合生物2024銅蟲 (小有名氣)
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細(xì)胞污染問題:原因分析與解決方案
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真菌污染 如果你看到培養(yǎng)皿中出現(xiàn)了絮狀、棉絮般的漂浮物,或者有類似蜘蛛網(wǎng)的結(jié)構(gòu)延伸開來️,那多半是被真菌光顧了。顯微鏡下能看到明顯的菌絲結(jié)構(gòu),有時還會有孢子。真菌生長相對緩慢,但一旦發(fā)現(xiàn),基本就是全軍覆沒的節(jié)奏... 支原體污染 這個是最"陰險"的!肉眼看不出異常,細(xì)胞可能生長速度變慢,形態(tài)略有改變,但并不明顯。支原體污染需要特殊染色或PCR檢測才能確認(rèn),卻會嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果! **小tips:**定期用DAPI染色檢查支原體污染,藍(lán)色熒光下如果看到細(xì)胞核外有許多小點(diǎn)狀熒光,就要警惕支原體污染了! 污染源頭大起底 操作不當(dāng):手套沒消毒就亂摸、說話噴沫、超凈臺未提前開紫外燈...(我承認(rèn)我都犯過) 試劑污染:過期培養(yǎng)基、冰箱反復(fù)凍融的血清、被污染的胰酶等 設(shè)備問題:CO2培養(yǎng)箱內(nèi)壁長期未清潔、水盤變質(zhì)、超凈臺風(fēng)速不穩(wěn)定 環(huán)境因素:實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量差、近期裝修或管道工程、共用培養(yǎng)箱交叉污染 **小tips:**建立"污染日志",記錄每次污染的細(xì)節(jié)和可能原因,長期積累可以發(fā)現(xiàn)你實(shí)驗(yàn)室特有的污染規(guī)律! 預(yù)防措施大全 嚴(yán)格無菌操作:75%酒精噴手套,所有物品入超凈臺前消毒,減少說話 定期清潔設(shè)備:每月清潔培養(yǎng)箱,每周檢查水盤,每天紫外燈照射超凈臺30分鐘 試劑管理:培養(yǎng)基分裝小瓶使用,避免大瓶反復(fù)開蓋;血清、胰酶等分裝凍存 建立習(xí)慣:操作順序從"干凈"到"臟",如先處理健康細(xì)胞,再處理可疑細(xì)胞 **小tips:**在培養(yǎng)基中適當(dāng)添加青霉素/鏈霉素抗生素混合液可以預(yù)防細(xì)菌污染,但記住這只是"保險措施"而非"免死金牌"! 污染應(yīng)急處理SOS 立即隔離:發(fā)現(xiàn)污染立刻將可疑培養(yǎng)皿移出培養(yǎng)箱,放入密封袋中處理 徹底消毒:受污染區(qū)域增加消毒頻率,培養(yǎng)箱可用75%酒精徹底擦拭 追蹤溯源:檢查同批次試劑、同一時間操作的其他細(xì)胞情況 細(xì)胞搶救:輕度污染可嘗試高濃度抗生素處理+頻繁換液,但成功率較低 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容:分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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