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免疫熒光(IF)實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作流程
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1.?樣本前處理:細(xì)胞爬片/組織切片經(jīng)4%多聚甲醛固定,0.1% Triton X-100通透,5% BSA封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。 ? 2.?一抗孵育:稀釋后一抗4℃孵育過夜,PBS洗滌3次×5min 去除未結(jié)合抗體。 ? 3.?二抗孵育:熒光標(biāo)記二抗室溫避光孵育1-2h,避光洗滌3次×5min。 ? 4.?染核封片:DAPI染核10min,抗熒光淬滅封片劑封片。 ? 5.?鏡檢分析:激光共聚焦顯微鏡觀察,采集圖像并進(jìn)行后續(xù)分析。 建議收藏,規(guī)范操作出好圖! 發(fā)自小木蟲手機(jī)客戶端 |
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