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大家用細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)的時(shí)候，有沒(méi)有遇到過(guò)狀態(tài)不穩(wěn)定或者效率上不去的問(wèn)題？
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最近在實(shí)驗(yàn)室用細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)做一批細(xì)胞，產(chǎn)量和狀態(tài)時(shí)好時(shí)壞的，折騰得夠嗆。想著這東西現(xiàn)在用的人應(yīng)該不少，就上來(lái)和大家嘮嘮，看看有沒(méi)有遇到類似情況或者有經(jīng)驗(yàn)的老師給指點(diǎn)指點(diǎn)。 現(xiàn)在的細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)確實(shí)方便，從搖床到生物反應(yīng)器，能自動(dòng)控溫控pH控溶氧，理論上細(xì)胞該長(zhǎng)得又快又好。但實(shí)際操作起來(lái)，經(jīng)常遇到些說(shuō)大不大說(shuō)小不小的問(wèn)題。比如明明參數(shù)都設(shè)對(duì)了，細(xì)胞長(zhǎng)著長(zhǎng)著突然代謝就慢了，或者活率開(kāi)始往下掉；有時(shí)候不同批次之間產(chǎn)量波動(dòng)特別大，重復(fù)性不好把握。我們就在琢磨，是培養(yǎng)基成分有細(xì)微差別，還是補(bǔ)料策略沒(méi)調(diào)好？或者是不是傳代時(shí)機(jī)和接種密度這些基礎(chǔ)操作其實(shí)影響比想象中還大？ 特別是當(dāng)體系從搖瓶放大到反應(yīng)器的時(shí)候，那些在搖瓶里長(zhǎng)得挺好的細(xì)胞，一上系統(tǒng)反而狀態(tài)不穩(wěn)定了，溶氧、剪切力這些物理因素的影響好像比預(yù)想的明顯。不知道大家在實(shí)際操作中，有沒(méi)有總結(jié)出什么能讓細(xì)胞在細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)里穩(wěn)定高效擴(kuò)增的經(jīng)驗(yàn)？比如怎么根據(jù)代謝數(shù)據(jù)及時(shí)調(diào)整策略，或者有沒(méi)有什么容易被忽略的關(guān)鍵參數(shù)需要特別監(jiān)控？ |
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