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急性肝損傷動物模型｜5種經(jīng)典造模流程全攻略?: 領(lǐng)取紅包 (小木蟲手機(jī)app專屬紅包)

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急性肝損傷模型是肝病機(jī)制研究、保肝藥物篩選的核心工具，以下整理5種最常用的標(biāo)準(zhǔn)化造模流程，覆蓋化學(xué)性、藥物性、免疫性等主流類型，關(guān)鍵細(xì)節(jié)+避坑要點(diǎn)一次講透～

一、四氯化碳（CCl?）誘導(dǎo)·化學(xué)性肝損傷（最常用）

核心原理

CCl?經(jīng)肝臟CYP酶活化生成自由基，引發(fā)細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化，導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡壞死，成模率高、重復(fù)性強(qiáng)。

造模流程

1.?動物選擇：8周齡C57BL/6或BABL/c小鼠（體重22±2g），每組10-15只。
?
2.?試劑配制：用橄欖油/豆油將CCl?稀釋至0.1%-1%（v:v），渦旋振蕩1-2h至均勻，避免造模差異。
?
3.?給藥方式：1mL注射器腹腔/口服/皮下注射，劑量遵循「腹腔≥口服≥皮下」，需預(yù)實驗確定最佳劑量。
?
4.?成模與取樣：16-24h后成模，禁食8h后麻醉采血（測ALT、AST），取肝組織做病理分析。

避坑要點(diǎn)

- 劑量不宜過高，否則動物易中毒死亡，且藥效難以顯現(xiàn)；
?
- 24h后肝臟會自我修復(fù)，ALT、AST指標(biāo)下降，需按時取樣。

二、對乙酰氨基酚（APAP）誘導(dǎo)·藥物性肝損傷

核心原理

過量APAP代謝生成毒性產(chǎn)物NAPQI，耗盡肝內(nèi)谷胱甘肽（GSH）后，與線粒體蛋白結(jié)合導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死，模擬臨床藥物性肝損傷。

造模流程

1.?動物選擇：8周齡小鼠（體重22±2g），每組10-15只。
?
2.?試劑配制：APAP現(xiàn)配現(xiàn)用，60-70℃熱水溶解（難溶于常溫水），給藥時需持續(xù)溫水浴防析出。
?
3.?給藥方式：一次性腹腔注射，劑量50-300mg/kg（常用60-75mg/kg）。
?
4.?成模與取樣：24h左右成模，采血測肝功能，肝組織做病理檢查。

避坑要點(diǎn)

- 全程保證試劑溶解狀態(tài)，析出會導(dǎo)致造模不均；
?
- 嚴(yán)格控制劑量，避免動物急性中毒死亡。

三、刀豆蛋白A（ConA）誘導(dǎo)·免疫性肝損傷

核心原理

ConA激活NK細(xì)胞、T細(xì)胞釋放炎癥因子（IFN-γ、TNF-α），引發(fā)免疫炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷，適用于T細(xì)胞介導(dǎo)的肝損傷機(jī)制研究。

造模流程

1.?動物選擇：8周齡小鼠（體重22±2g），每組10-15只。
?
2.?試劑配制：ConA用生理鹽水溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
?
3.?給藥方式：尾靜脈注射，劑量10-25mg/kg（常用20mg/kg）。
?
4.?成模與取樣：2-8h出現(xiàn)顯著損傷，8-16h達(dá)高峰，采血測ALT、AST、LDH，肝組織做病理分析。

避坑要點(diǎn)

- 成模持續(xù)時間短，需提前摸索最佳取樣時間；
?
- 尾靜脈注射需熟練操作，避免藥液外漏影響劑量。

四、D-氨基半乳糖+脂多糖（D-GalN+LPS）誘導(dǎo)·免疫性肝損傷

核心原理

D-GalN提高肝臟對LPS的敏感性，LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞釋放過量TNF-α，導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡，是研究炎癥介導(dǎo)肝損傷的經(jīng)典模型。

造模流程

1.?動物選擇：8周齡小鼠（22±2g）或SD大鼠（220±20g），每組8-15只。
?
2.?試劑配制：D-GalN與LPS分別用生理鹽水溶解，混合后現(xiàn)配現(xiàn)用。
?
3.?給藥方式：一次性腹腔注射（推薦），按最佳比例搭配劑量（需預(yù)實驗確定）。
?
4.?成模與取樣：5-8h成模，采血測肝功能，肝組織做病理檢查。

避坑要點(diǎn)

- 腹腔注射時動物頭部向下，避免針尖戳傷其他器官；
?
- 兩種試劑比例需精準(zhǔn)，否則影響成模穩(wěn)定性。

五、乙醇誘導(dǎo)·酒精性肝損傷

核心原理

大量乙醇在肝臟代謝產(chǎn)生氧化應(yīng)激，干擾脂肪代謝，導(dǎo)致肝細(xì)胞脂肪變性、損傷，模擬急性酒精性肝損傷。

造模流程

1.?動物選擇：成年大鼠（180-220g）或小鼠（18-22g），單一性別，每組8-15只。
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2.?試劑配制：無水乙醇用純凈水稀釋至50%濃度。
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3.?給藥方式：一次性經(jīng)口灌胃，小鼠劑量4800-5600mg/kg（灌胃量12ml/kg）。
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4.?成模與取樣：灌胃后16h禁食，麻醉采血測TG、VLDL，肝組織做病理（觀察脂肪變性）。

避坑要點(diǎn)

- 灌胃速度不宜過快，避免動物嗆咳、嘔吐；
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- 嚴(yán)格控制乙醇濃度和劑量，防止急性酒精中毒。
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