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畢合生物2024銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
微生物培養(yǎng)失敗？
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一、菌種原因 菌種老化 菌種如果經(jīng)過連續(xù)頻繁的傳代達十幾次甚至幾十次，就會造成菌種老化，岀現(xiàn)生長緩慢甚至不生長的情況。 野生菌種 相比于標準菌株，有一些野生分離的菌種本身比較脆弱，對營養(yǎng)要求比較高，對外界不良環(huán)境也比較敏感，難以在普通的平板上生長，往往需要加入特殊的營養(yǎng)物質(zhì)。 菌種沒有進行充分活化 當我們拿到一株菌的時候，該菌種往往是處于—個保藏狀態(tài)的，這就需要我們通過合適的培養(yǎng)基來逐代擴大培養(yǎng)，得到活力旺盛的菌株，所以充分活化的目的就是要讓菌種逐漸適應培養(yǎng)環(huán)境，從而在平板上快速生長。 樣品中的菌 有的樣品中本身含菌量就較少，如水樣、供試液等，接種量低造成平板上無菌生長。還有的樣品中含有一些抑菌成分，會殺死樣品中的菌，導致無菌落生長。 購買的商品化菌株 有一些商品化的菌株，如益生菌、菌肥、可食用真菌等，本身進行過基因改造，不能進行連續(xù)傳代擴大培養(yǎng)，故在平板上難以生長。 二、人員操作不當 1、容器未洗刷干凈，殘留的抑菌成分導致菌不生長。 2、培養(yǎng)基配置過程中稱量錯誤，加入添加劑比例錯誤等。 3、過度滅菌，有很多培養(yǎng)基成分不耐高溫，過度滅菌會導致成分失效。 4、調(diào)pH值錯誤，不同溫度下培養(yǎng)基的pH值也會不一樣，未正確的調(diào)配pH值，也會導致菌不生長。 5、在實驗操作過程中失誤，特別是在稀釋菌液過程中少接或者錯接菌。 6、未放置合適的培養(yǎng)條件，根據(jù)不同菌對氧氣的需求程度，可以分為需氧、厭氧、微需氧培養(yǎng)等。根據(jù)不同菌對溫度的需求，又可以在25°C、30°C、35°C、42°C、56°C等不同溫度下培養(yǎng)。 三、培養(yǎng)基及添加劑原因 1、成品培養(yǎng)基本身質(zhì)量不好，如原材料純度不高、含有抑菌成分、原材料之間配比錯誤等都會導致成品培養(yǎng)基不合格。 2、特殊培養(yǎng)基及添加劑未正確存放，未遮光、冷藏、嚴格密封保存等導致失效。 3、培養(yǎng)基及添加劑超過有效期或者臨近有限期，營養(yǎng)成分存在一定程度的失效導致菌不生長。 4、培養(yǎng)基及添加劑營養(yǎng)不夠或者不適合培養(yǎng)某類菌種。有一些菌種本身營養(yǎng)要求比較特殊，需要添加某些特殊營養(yǎng)后方能生長。 5、培養(yǎng)基pH值發(fā)生改變，有一些特殊的成品培養(yǎng)基pH值隨時間會存在一定程度的改變，在使用前需要對pH值重新進行調(diào)整，否則也會導致菌不生長。 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務內(nèi)容：分子生物學、免疫, 重組蛋白及ELISA相關、活性小分子化合物、高端化學、材料化學、細胞資源庫與培養(yǎng)相關、生命科學、天然產(chǎn)物 |
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