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如何判斷哪種失活?
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如何判斷是哪種失活? 1. 分析型HPLC: · 如果主峰消失或變小,出現(xiàn)更早洗脫的峰(可能是水解片段),說明發(fā)生了化學降解(水解)。 · 如果主峰變小或消失,在進樣峰或死體積處出現(xiàn)大峰(不保留物質(zhì)),或在色譜圖末端出現(xiàn)聚集峰,說明發(fā)生了物理聚集。 · 如果主峰保留時間發(fā)生偏移(通常是提前),旁邊出現(xiàn)肩峰或新峰,很可能是發(fā)生了脫酰胺(增加負電荷,使其更親水)。 2. 質(zhì)譜: · 分子量增加16Da → 氧化。 · 分子量增加1Da或17Da → 脫酰胺(Asn→Asp +1Da,或進一步酸化)。 · 分子量減少18Da → 環(huán)化(如天冬酰胺酰亞胺形成)。 · 出現(xiàn)多個小分子量雜峰 → 肽鍵水解斷裂。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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