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1073268128新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
氨基酸的分類(lèi)
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第三步:氨基酸偶聯(lián) · 目的:將下一個(gè)Fmoc保護(hù)的氨基酸通過(guò)縮合反應(yīng)連接到已脫保護(hù)的氨基上。 · 操作: 1. 配制活化好的氨基酸溶液: · Fmoc-氨基酸:通常為0.1-0.2 M DMF溶液。 · 縮合劑:如HATU, HBTU等,同等摩爾濃度于DMF中。 · 堿:如N,N-二異丙基乙胺,摩爾數(shù)為縮合劑的2倍。 · 將以上三者預(yù)活化1-2分鐘后,立即加入反應(yīng)器中。 2. 讓偶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行 30-60分鐘。對(duì)于困難序列或位阻氨基酸,可延長(zhǎng)至數(shù)小時(shí)或進(jìn)行雙重偶聯(lián)。 3. 排掉反應(yīng)液。 · 關(guān)鍵細(xì)節(jié): · 氨基酸和縮合劑需過(guò)量(通常2-5倍),以驅(qū)動(dòng)反應(yīng)趨于完全。 · 確保氨基酸完全溶解。 · 對(duì)于困難序列,使用更強(qiáng)效的縮合劑(如HATU/HOAt)和添加劑(如Oxyma Pure)。 第四步:循環(huán)重復(fù)(第二步 ? 第三步) · 完成一個(gè)氨基酸的偶聯(lián)后,用DMF充分洗滌樹(shù)脂。 · 然后重復(fù) 第二步(脫保護(hù)) 和 第三步(偶聯(lián)),直至整個(gè)多肽序列合成完畢。 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
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