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核心原理
使用三氟乙酸作為主酸，在搭配各種“清除劑”的混合液中，同時(shí)完成以下兩件事：
1. 切斷多肽與樹脂之間的連接鍵。
2. 移除氨基酸側(cè)鏈的保護(hù)基團(tuán)。
最終得到粗品多肽。
關(guān)鍵步驟
1. 配制切割試劑
· 主劑：三氟乙酸，占總體積的90%以上。
· 清除劑：根據(jù)多肽序列添加，用于捕獲強(qiáng)酸環(huán)境下產(chǎn)生的副產(chǎn)物，保護(hù)多肽。
· 水：清除tBu等保護(hù)基產(chǎn)生的陽離子。
· 苯甲硫醚：清除Pbf、Trt等保護(hù)基產(chǎn)生的陽離子。
· 乙二硫醇/三異丙基硅烷：作為“清道夫”，防止烷基化等副反應(yīng)。
· 苯酚：防止精氨酸側(cè)鏈發(fā)生副反應(yīng)。
2. 選擇配方（根據(jù)多肽序列）
· 標(biāo)準(zhǔn)配方（適用于不含Cys, Met, Trp的簡單多肽）：
· TFA : 水 : 苯甲硫醚 : 乙二硫醇 = 92.5 : 2.5 : 2.5 : 2.5
· “難纏”序列配方（適用于含Cys, Met, Trp的多肽）：
· TFA : 水 : 苯甲硫醚 : 乙二硫醇 : 苯酚 = 90 : 2.5 : 2.5 : 2.5 : 2.5
· 作用：乙二硫醇和苯甲硫醚能有效防止半胱氨酸和甲硫氨酸被氧化。
3. 進(jìn)行切割反應(yīng)
· 將干燥的肽-樹脂復(fù)合物浸泡在配制好的切割液中。
· 在室溫下攪拌反應(yīng) 2 - 4 小時(shí)。
4. 分離與沉淀
· 過濾：反應(yīng)完成后，過濾掉樹脂，收集含有粗品多肽的TFA溶液。
· 沉淀：將TFA溶液緩慢滴加到冰浴的冷乙醚中。
· 離心：多肽會(huì)形成沉淀，通過離心收集。

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