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1073268128新蟲(chóng) (小有名氣)
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二硫鍵反應(yīng)條件
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二硫鍵反應(yīng)條件選取 二硫鍵就是指蛋白質(zhì)或 多肽分子結(jié)構(gòu)中兩個(gè)不同位點(diǎn)Cys的巰基(-SH)被氧化所產(chǎn)生的S-S共價(jià)鍵。一條多肽鏈上不一樣的位置的氨基酸中間所產(chǎn)生的二硫鍵,能夠把多肽鏈折疊成特定的空間分布。多肽分子一般來(lái)說(shuō)分子量很大,空間分布繁瑣,結(jié)構(gòu)中產(chǎn)生二硫鍵時(shí)需要兩個(gè)半胱氨酸在空間距離上非常接近。另外,多肽結(jié)構(gòu)中還原態(tài)的巰基化學(xué)特性活躍,很容易出現(xiàn)其它的副作用,同時(shí)肽鏈上其余側(cè)鏈也可能會(huì)出現(xiàn)許多修飾,所以,多肽鏈采取修飾所選擇的氧化劑和氧化條件是反應(yīng)的重要因素,反應(yīng)原理也較為復(fù)雜,既有可能是自由基反應(yīng),也有可能是離子反應(yīng)。反應(yīng)條件有許多種選擇,例如空氣氧化,DMSO氧化等溫和的氧化過(guò)程,或H2O2,I2,汞鹽等劇烈的反應(yīng)條件。 1、空氣氧化法 空氣氧化法生成二硫鍵是多肽合成中最具代表性的辦法,一般是將巰基處在還原態(tài)的多1解于水里,在近中性或弱堿性環(huán)境下(PH值6.5-10),反應(yīng)24個(gè)小時(shí)以上。為了降低分子相互間二硫鍵產(chǎn)生的可能性,這種方法往往需要在較低濃度的環(huán)境下完成。 2、碘氧化法 將多肽溶解于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中,逐滴滴加10-15mol/L的碘來(lái)進(jìn)行氧化,反應(yīng)15-40min。當(dāng)多肽鏈里面含有對(duì)碘特別敏感的Tyr、Trp、Met和His的殘基時(shí),氧化條件要非常精準(zhǔn),氧化完成后,立即加入維生素C或硫代硫酸鈉清除過(guò)多的碘。#多肽合成公司# |
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