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畢合生物2024銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
做cck8/MTT一定要避開這些坑!
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1、若是加藥測細胞活力,首先判斷是否帶有顏色?若有顏色很可能與cck8/MTT反應,導致所有孔的od值亂亂的,這是需要做陰性對照,也就是:沒有細胞,只加藥的孔~最后:有細胞的孔od值➖陰性對照od值🟰最終od值 2、96孔板四周邊緣的孔,不要加細胞檢測,有概率污染,可以用pbs補充。 3、96孔板有些蓋子和孔板不是很貼合,蓋上以后檢查一下是否完全蓋上了?有些孔板需要大力磕一下才能完全蓋上,蓋不緊的話容易污染。 4、處理24小時可以用100ul細胞懸液,若處理48小時甚至更久,建議用200ul細胞懸液,但細胞量不變,只改變體積即可!細胞量可用1萬/100ul~ 5、可做5個復孔,od值測出來后,舍去最大值and最小值,剩下的3個值作圖,盡可能減少非必要的重復! 6、酶標儀測吸光度時,盡量不要有氣泡,若有過多氣泡,如果實驗室有吹風機,可以用吹風機斜著吹1~2秒,氣泡會立馬消失的,不會影響結(jié)果~ 7、96孔板鋪板不需要特意搖晃孔板混勻哦,細胞加進去即可,加藥,加cck8以后,用手輕拍孔板側(cè)邊就行,然后再放入培養(yǎng)箱。 8、貼壁細胞比較簡單,可換液,懸浮細胞鋪板以后就不要再換液了。 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務內(nèi)容:分子生物學、免疫, 重組蛋白及ELISA相關、活性小分子化合物、高端化學、材料化學、細胞資源庫與培養(yǎng)相關、生命科學、天然產(chǎn)物 |
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