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啟真生物新蟲 (初入文壇)
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[交流]
類器官染色與功能驗證技術(shù)指南——細胞活性、增殖與死亡狀態(tài)鑒定 已有1人參與
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評估類器官的健康狀態(tài)和生長動態(tài)。 活/死細胞染色： 目的： 快速區(qū)分活細胞和死細胞。 常用染料： 鈣黃綠素AM (Calcein-AM, 活細胞綠色熒光)，碘化丙啶 (PI, 死細胞紅色熒光) 或 SYTOX系列染料。可直接在培養(yǎng)液中染色，活細胞成像觀察。 鑒定要點： 計算活細胞比例，觀察死細胞分布（如是否集中在中心提示壞死）。 增殖標志物染色： 目的： 檢測處于增殖周期的細胞。 常用方法： 免疫染色： Ki67 (廣泛使用的增殖核抗原)，PCNA。 EdU/BrdU摻入： 在培養(yǎng)液中加入核苷類似物EdU或BrdU，它們會被合成DNA的細胞攝入。通過點擊化學(xué)反應(yīng)(EdU)或抗體檢測(BrdU)可視化。更直接反映DNA合成期細胞。 鑒定要點： 增殖細胞的比例及分布（如是否在預(yù)期的增殖區(qū)域，如隱窩底部、導(dǎo)管末端芽）。 凋亡檢測： 目的： 檢測程序性死亡的細胞。 常用方法： 免疫染色： Cleaved Caspase-3 (凋亡執(zhí)行關(guān)鍵分子)。 TUNEL法： 標記DNA斷裂末端（凋亡晚期特征）。 鑒定要點： 凋亡細胞的比例及分布（正常發(fā)育中也可能有凋亡，需結(jié)合背景判斷）。 |
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2樓2025-08-27 09:31:00
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