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業(yè)蓮11新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
美拉徳反應(yīng)!opa法測(cè)游離氨基酸接枝度為負(fù)數(shù) 已有3人參與
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我用的是酪蛋白-麥芽糖糊精作為接枝材料,用磷酸鹽緩沖液(PH=7)控制酪蛋白含量2%,比例1:1,溫度90°,水浴時(shí)間3h,反應(yīng)后有明顯褐色物質(zhì)生成,用公式1-(反應(yīng)前混合物吸光值/反應(yīng)后復(fù)合物吸光值)計(jì)算出來(lái)的全都是負(fù)值。各種比例,蛋白含量,溫度時(shí)間我都嘗試了,opa溶液現(xiàn)配現(xiàn)用現(xiàn)測(cè),避光也做了,其中opa100ml:opa固體80mg(2ml95%乙醇),5ml20%SDS,50ml硼酸緩沖液(ph=9.5),200ulβ-疏基乙醇,加去離子水至100ml。取稀釋10倍200ul樣液(2mg/ml)和4mlopa溶液反應(yīng)測(cè)吸光值,測(cè)了兩周了,各種稀釋倍數(shù)都試過(guò)了,全都是反應(yīng)后的吸光值更大,好迷茫,有大佬或者相關(guān)實(shí)驗(yàn)的兄弟姐妹告訴我有什么問(wèn)題存在嗎,該怎么改進(jìn)啊,救救孩子! @lovibond 發(fā)自小木蟲(chóng)手機(jī)客戶端 |
鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)
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