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畢合生物2024銅蟲 (小有名氣)
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微生物菌種保藏與活化攻略
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1️⃣ 保藏方法大揭秘 傳代培養(yǎng)保藏法:這是最簡單的短期保藏方法,就像把細(xì)菌們放在“小旅館”里,定期給它們“換房間”。把菌種接種在固體斜面培養(yǎng)基上,放在4℃冰箱里保存。不過,這種方法保藏時間短,細(xì)菌們?nèi)菀住棒[脾氣”發(fā)生變異,而且“小旅館”還容易被“不速之客”污染。像普通細(xì)菌只能保存1個月左右,假單胞菌2周就得“換房間”一次。 液體石蠟覆蓋保藏法:這種方法就像是給細(xì)菌們穿上了一層“雨衣”,隔絕空氣,防止水分蒸發(fā)。把液體石蠟注入斜面培養(yǎng)物中,讓細(xì)菌們在“雨衣”保護(hù)下安靜地“睡覺”,保藏時間可以延長到1-2年,霉菌、放線菌、芽孢細(xì)菌甚至能睡2年以上呢! 載體保藏法:想象一下,細(xì)菌們坐在“小沙發(fā)”上,然后被風(fēng)干。把細(xì)菌們吸附在土壤、沙子、硅膠、濾紙等“小沙發(fā)”上,再進(jìn)行干燥保藏。這種方法適合那些會產(chǎn)芽孢或孢子的“小頑皮”,保藏時間可達(dá)2年。 冷凍保藏法:這是利用低溫讓細(xì)菌們的“新陳代謝”慢下來,就像把它們放進(jìn)“冰箱”里。有-20℃冰箱保存、-80℃冰箱保存和液氮保存(-196℃)幾種方式。甘油管冷凍保藏法是把菌種懸浮在甘油保護(hù)劑中,然后放進(jìn)“冰箱”,保藏時間可達(dá)數(shù)年,適合大多數(shù)微生物。 冷凍干燥保藏法:這種方法是先把細(xì)菌們在極低溫度下快速冷凍,然后在減壓下把水分“趕跑”,就像給細(xì)菌們做了一個“真空包裝”。 液氮超低溫保藏法:這是最“豪華”的保藏方式,把菌種懸浮在保護(hù)劑中,放進(jìn)-196℃的液氮里。這種方法保藏時間最長,適合大多數(shù)微生物。 2️⃣ 活化方法速速學(xué) 傳代培養(yǎng)保藏法的活化:直接從斜面培養(yǎng)基上挑取少量菌體,轉(zhuǎn)接到新鮮的斜面培養(yǎng)基上,就像給細(xì)菌們換了個“新家”。通常需要連續(xù)傳代2-3次,細(xì)菌們就能恢復(fù)活力啦。 液體石蠟覆蓋保藏法的活化:挑取少量菌體轉(zhuǎn)接到適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長繁殖后再重新轉(zhuǎn)接一次,細(xì)菌們就能“滿血復(fù)活”啦。 載體保藏法的活化:從載體中取出少量菌體,轉(zhuǎn)接到適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。比如沙土管保藏的菌種,取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上,長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次。 冷凍保藏法的活化:把凍存管從冰箱或液氮罐中取出,立即放入38℃-40℃的水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)搖動,直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止。然后把內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。 冷凍干燥保藏法的活化:先用75%酒精擦拭安瓿上部,把安瓿管頂部燒熱,用冷水使其破裂。然后用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊,移入新鮮培養(yǎng)基中進(jìn)行適溫培養(yǎng)。 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容:分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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