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畢合生物2024銅蟲 (小有名氣)
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🌟細(xì)胞也會“窒息”?培養(yǎng)基深度的秘密✨
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細(xì)胞培養(yǎng)里那些容易被忽視的小細(xì)節(jié),比如培養(yǎng)基深度對細(xì)胞的影響。你有沒有想過,細(xì)胞也會“窒息”呢?快來看看這篇超實用的攻略吧! 細(xì)胞“窒息”的真相 在哺乳動物體內(nèi),氧氣從毛細(xì)血管擴(kuò)散到細(xì)胞的距離非常短,一般不超過100μm。但在體外培養(yǎng)系統(tǒng)中,細(xì)胞獲取氧氣就難多了。氧氣必須從培養(yǎng)基表面擴(kuò)散到底部才能到達(dá)細(xì)胞,這個距離就是培養(yǎng)基深度,通常為幾毫米——距離是體內(nèi)的數(shù)十倍。 氧氣在液體中的擴(kuò)散遵循菲克第一定律,簡單來說就是:擴(kuò)散速率和粒子濃度梯度成正比,和擴(kuò)散距離成反比。所以,想提升擴(kuò)散速率,要么增加培養(yǎng)基上方的氧氣濃度,要么降低培養(yǎng)基的高度。 如何優(yōu)化培養(yǎng)條件 1️⃣降低培養(yǎng)基體積 降低培養(yǎng)基體積可以顯著改善細(xì)胞周圍的氧氣濃度。例如,將培養(yǎng)基體積從1mL減少到0.5mL,可以顯著提高細(xì)胞周圍的氧氣濃度,減少細(xì)胞的缺氧狀態(tài)。 2️⃣優(yōu)化培養(yǎng)基深度 優(yōu)化培養(yǎng)基深度,使其更接近體內(nèi)水平。例如,將培養(yǎng)基深度從2.4mm減少到1.2mm,可以顯著提高氧氣擴(kuò)散速率,減少細(xì)胞的缺氧狀態(tài)。 3️⃣增加氧氣濃度 增加培養(yǎng)基上方的氧氣濃度,例如使用高氧培養(yǎng)箱或增加培養(yǎng)箱內(nèi)的氧氣濃度,可以顯著提高細(xì)胞周圍的氧氣濃度。 4️⃣定期更換培養(yǎng)基 定期更換培養(yǎng)基可以確保細(xì)胞周圍的氧氣濃度和營養(yǎng)成分充足。建議每2-3天更換一次培養(yǎng)基,確保細(xì)胞處于最佳生長狀態(tài)。 小貼士 無菌操作:所有操作都要求無菌,防止雜菌污染。 標(biāo)記培養(yǎng)皿:標(biāo)記好時間、細(xì)胞類型、培養(yǎng)條件等,方便后續(xù)觀察和記錄。 觀察細(xì)胞狀態(tài):定期觀察細(xì)胞的生長狀態(tài),確保細(xì)胞處于良好的生長環(huán)境中。 畢合生物提供服務(wù)內(nèi)容:分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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